RKO-E6细胞（提供STR鉴定报告）

RKO-E6细胞

细胞名称：人结肠癌转基因细胞；RKO-E6

规格：T25培养瓶，1×106cells

形态特征：上皮细胞样

生长特性：贴壁

RKO-E6细胞描述：

培养条件：MEM(Gibco cat:11095,或同配方)；10%胎牛血清；

1X非必需氨基酸(CellCook cat:CM1008S/L)

传代方法：1:3传代；消化2-3分钟。2-3天换液一次，6-8天传代一次。

冻存液配方：基础培养基+5%DMSO+10%FBS

特征特性：RKO-E6细胞系是用脂质体法转染pCMV-E6的结肠癌RKO细胞系。 该细胞含有稳定整合受控於巨细胞病毒启动子的人乳头状病毒（HPV）E6癌基因。 RKO-E6细胞系和它的母系RKO一起可用于研究p53缺失引起的细胞参数改变p53介导的转录和凋亡等。

RKO-E6细胞STR位点信息：

支原体感染会造成什么后果？

1、改变细胞膜状态

2、改变细胞生长习性

3、破坏细胞染色质

4、改变细胞表型

5、降低转染/转导效率

6、交叉感染其他细胞系

以上所有都会导致实验结果不可靠，重复性低！

RKO-E6细胞准备：

培养RKO-E6细胞之前必须有充足的思想准备，这株细胞非常好养，而且不能偷懒，必须勤快。细胞对氧气、密度和养分非常敏感，稍微偷懒拖一天不换液，可能就会导致细胞全部死亡的后果。只要保持换液和传代频率，多注意细胞密度，这株细胞还是可以征服的！

RKO-E6细胞培养技巧：

建议平躺着培养该细胞，以增大空气交换面积，且液体高度最好不要超过3mm，一般T25培养瓶加6-8ml培养基，T75培养瓶加15ml左右培养基即可。培养基尽量现配，配好的培养基最好两周内用完，因为叶酸不稳定易分解。

一般情况下细胞2-3天换液一次，即使培养基没有变黄。换液时轻轻侧过培养瓶/皿，不要使细胞飘起来，用巴氏吸管轻轻吸取部分上清弃去，补加等体积的新鲜培养基继续培养。或者将全部培养液转移至离心管中，1000rpm离心5min，吸去上清后用新鲜培养轻轻重悬后重新种瓶，重悬时不可吹打过度。细胞对离心和吹打比较敏感，离心和反复吹打会影响细胞状态，建议只在细胞产生大量碎片时才离心清洗。平常换液建议半换，传代可直接补加足够新鲜的培养基后直接分瓶。

细胞团长至肉眼可见，且T25瓶子有几十上百个小团时，细胞数量已经比较多，此时应该2天换液一次。当一个20倍视野有4-5个大细胞团时应该进行传代。传代时加入两倍体积的新鲜培养基后，轻轻吹打细胞团，将大的细胞团打散成小团，但不要剧烈吹打成单细胞悬液，因为单个的细胞是基本没有增殖活力的细胞，然后将混匀的细胞悬液转移至新的培养瓶中。或者将细胞悬液转移至离心管中，1000rpm离心5min后，弃去上清，加入三倍体积的新鲜培养基轻轻重悬后转移至三个新的培养瓶中。

冻存液用50%血清+40%完全培养基+10%DMSO。细胞数量应在0.5-1.0×106/ml为宜。复苏时可适当加大胎牛血清的含量，以使细胞尽快长起来。复苏后细胞需要重新聚团及较长的潜伏期，故复苏时间较长，期间应多加观察，并注意更换培养基，频率为3天一换（半换）。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！