NK-92/MI细胞（提供STR鉴定报告）

NK-92/MI细胞

细胞名称：人自然杀伤细胞；NK92

规格：T25培养瓶，1×106cells

形态特征：淋巴细胞样

生长特性：悬浮

NK-92/MI细胞描述：

NK-92/MI细胞是从一位患有急进性非霍奇金淋巴瘤的50岁白人男性外周血单核细胞衍生来的一株白细胞介素-2依赖型NK细胞株。NK-92MI是转染得到的源自NK-92的IL-2非依赖的NK细胞株，亲本细胞通过微粒体基因转化法用逆转录病毒MFG-hIL-2载体携带的人IL-2 cDNA进行转化。可能由于载体整合到基因组DNA中，转化是稳定的。这株细胞对很多恶性细胞有细胞毒性；铬释放试验显示它能杀死K562和Daudi细胞。NK-92细胞有以下特征：CD2,CD7,CD11a,CD28,CD45,CD54和CD56阳性；CD1,CD3,CD4,CD5,CD8,CD10,CD14,CD16,CD19,CD20,CD23,CD34和HLA-DR阴性。

培养条件：α-MEM  12.5%FBS 12.5%马血清 0.2 mM肌醇，0.1 mM巯基乙醇，0.02 mM叶酸

传代方法： 1:3传代。或维持细胞浓度在2 x 105 – 1 x 106 个细胞/ml之间。

NK-92/MI细胞STR位点信息：

支原体感染会造成什么后果？

1、改变细胞膜状态

2、改变细胞生长习性

3、破坏细胞染色质

4、改变细胞表型

5、降低转染/转导效率

6、交叉感染其他细胞系

以上所有都会导致实验结果不可靠，重复性低！

NK-92/MI细胞准备：

培养NK-92/MI细胞之前必须有充足的思想准备，这株细胞非常好养，而且不能偷懒，必须勤快。细胞对氧气、密度和养分非常敏感，稍微偷懒拖一天不换液，可能就会导致细胞全部死亡的后果。只要保持换液和传代频率，多注意细胞密度，这株细胞还是可以征服的！

NK-92/MI细胞培养技巧：

建议平躺着培养该细胞，以增大空气交换面积，且液体高度最好不要超过3mm，一般T25培养瓶加6-8ml培养基，T75培养瓶加15ml左右培养基即可。培养基尽量现配，配好的培养基最好两周内用完，因为叶酸不稳定易分解。

一般情况下细胞2-3天换液一次，即使培养基没有变黄。换液时轻轻侧过培养瓶/皿，不要使细胞飘起来，用巴氏吸管轻轻吸取部分上清弃去，补加等体积的新鲜培养基继续培养。或者将全部培养液转移至离心管中，1000rpm离心5min，吸去上清后用新鲜培养轻轻重悬后重新种瓶，重悬时不可吹打过度。细胞对离心和吹打比较敏感，离心和反复吹打会影响细胞状态，建议只在细胞产生大量碎片时才离心清洗。平常换液建议半换，传代可直接补加足够新鲜的培养基后直接分瓶。

细胞团长至肉眼可见，且T25瓶子有几十上百个小团时，细胞数量已经比较多，此时应该2天换液一次。当一个20倍视野有4-5个大细胞团时应该进行传代。传代时加入两倍体积的新鲜培养基后，轻轻吹打细胞团，将大的细胞团打散成小团，但不要剧烈吹打成单细胞悬液，因为单个的细胞是基本没有增殖活力的细胞，然后将混匀的细胞悬液转移至新的培养瓶中。或者将细胞悬液转移至离心管中，1000rpm离心5min后，弃去上清，加入三倍体积的新鲜培养基轻轻重悬后转移至三个新的培养瓶中。

冻存液用50%血清+40%完全培养基+10%DMSO。细胞数量应在0.5-1.0×106/ml为宜。复苏时可适当加大胎牛血清的含量，以使细胞尽快长起来。复苏后细胞需要重新聚团及较长的潜伏期，故复苏时间较长，期间应多加观察，并注意更换培养基，频率为3天一换（半换）。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！