MOLT-4细胞
细胞名称:人急性淋巴母细胞性白血病细胞;MOLT-4
规格:T25培养瓶,1×106cells
形态特征:淋巴细胞样
生长特性:悬浮
MOLT-4细胞描述:
培养条件:RPMI 1640(Gibco cat:11875,或同配方) 10%胎牛血清
传代方法:不高于1:3传代;维持细胞浓度在4*10^5-2*10^6cells/ml;根据细胞浓度每2~3天补液1次。
冻存液配方:基础培养基+7.5%DMSO+10%FBS
MOLT-4细胞特征特性:MOLT-4与MOLT-3来源于一名19岁的男性急性淋巴细胞性白血病的复发患者,该患者前期接受过多种药物联合化疗。MOLT-4细胞系为T淋巴细胞起源,p53基因的第248位密码子有一个G→A突变,不表达p53,不表达免疫球蛋白或EB病毒;可产生高水平的末端脱氧核糖转移酶;表达CD1 (49%), CD2 (35%), CD3 A (26%) B (33%) C (34%), CD4 (55%), CD5 (72%), CD6 (22%), CD7 (77%)。
MOLT-4细胞STR位点信息:
STR Profile | AMEL | CSF1PO | D13S317 | D16S539 | D5S818 | D7S820 | TH01 | TPOX | vWA |
MOLT-4 | X, Y | 11,12,13 | 12,13 | 11,14 | 12 | 8,10,11 | 6,8 | 8 | 17,18 |
![QQ图片20200731180312_meitu_1.jpg QQ图片20200731180312_meitu_1.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/202007/uepic/8fddc94e-4107-4503-a123-2b72470164aa.jpg)
支原体感染会造成什么后果?
1、改变细胞膜状态
2、改变细胞生长习性
3、破坏细胞染色质
4、改变细胞表型
5、降低转染/转导效率
6、交叉感染其他细胞系
以上所有都会导致实验结果不可靠,重复性低!
MOLT-4细胞准备:
培养MOLT-4细胞之前必须有充足的思想准备,这株细胞非常好养,而且不能偷懒,必须勤快。细胞对氧气、密度和养分非常敏感,稍微偷懒拖一天不换液,可能就会导致细胞全部死亡的后果。只要保持换液和传代频率,多注意细胞密度,这株细胞还是可以征服的!
![QQ图片20200731181057.png QQ图片20200731181057.png](https://img1.17img.cn/17img/images/202007/uepic/cbdb4ac0-2e6a-46c1-afe4-24683245a5e0.jpg)
MOLT-4细胞培养技巧:
建议平躺着培养该细胞,以增大空气交换面积,且液体高度最好不要超过3mm,一般T25培养瓶加6-8ml培养基,T75培养瓶加15ml左右培养基即可。培养基尽量现配,配好的培养基最好两周内用完,因为叶酸不稳定易分解。
一般情况下细胞2-3天换液一次,即使培养基没有变黄。换液时轻轻侧过培养瓶/皿,不要使细胞飘起来,用巴氏吸管轻轻吸取部分上清弃去,补加等体积的新鲜培养基继续培养。或者将全部培养液转移至离心管中,1000rpm离心5min,吸去上清后用新鲜培养轻轻重悬后重新种瓶,重悬时不可吹打过度。细胞对离心和吹打比较敏感,离心和反复吹打会影响细胞状态,建议只在细胞产生大量碎片时才离心清洗。平常换液建议半换,传代可直接补加足够新鲜的培养基后直接分瓶。
细胞团长至肉眼可见,且T25瓶子有几十上百个小团时,细胞数量已经比较多,此时应该2天换液一次。当一个20倍视野有4-5个大细胞团时应该进行传代。传代时加入两倍体积的新鲜培养基后,轻轻吹打细胞团,将大的细胞团打散成小团,但不要剧烈吹打成单细胞悬液,因为单个的细胞是基本没有增殖活力的细胞,然后将混匀的细胞悬液转移至新的培养瓶中。或者将细胞悬液转移至离心管中,1000rpm离心5min后,弃去上清,加入三倍体积的新鲜培养基轻轻重悬后转移至三个新的培养瓶中。
冻存液用50%血清+40%完全培养基+10%DMSO。细胞数量应在0.5-1.0×106/ml为宜。复苏时可适当加大胎牛血清的含量,以使细胞尽快长起来。复苏后细胞需要重新聚团及较长的潜伏期,故复苏时间较长,期间应多加观察,并注意更换培养基,频率为3天一换(半换)。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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