Hs 578T细胞
细胞名称:人乳腺癌细胞;HS 578T
规格:T25培养瓶,1×106cells
形态特征: 上皮细胞样
生长特性:贴壁
Hs 578T细胞描述:
培养条件:DMEM,high glucose(Gibco cat:11995,或同配方);10%胎牛血清;
10ug/ml胰岛素(CellCook cat:CM1007)
传代方法:不高于1:3传代;消化2分钟。2-3天换液1次。
冻存液配方:基础培养基+5%DMSO+10%FBS
特征特性:Hs 578T细胞株源自乳房癌。 它与正常成纤维细胞样细胞株Hs 578Bst起源于同一位患者。Hs 578T细胞株最初是多角形的,但在传代过程中选择并克隆了星形的细胞形态。电镜下观察到酪蛋白颗粒聚集,桥粒,紧密连接,脂质体和光滑内质网小泡。与Hs 578Bst一样,未检测到雌激素受体和内生病毒。
Hs 578T细胞STR位点信息:
STR Profile | AMEL | CSF1PO | D13S317 | D16S539 | D5S818 | D7S820 | TH01 | TPOX | vWA |
HS 578T | X | 11,13 | 11,13 | 9,12 | 11,13 | 10 | 9,9.3 | 8 | 17 |
![QQ图片20200731180312_meitu_1.jpg QQ图片20200731180312_meitu_1.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/202007/uepic/8fddc94e-4107-4503-a123-2b72470164aa.jpg)
支原体感染会造成什么后果?
1、改变细胞膜状态
2、改变细胞生长习性
3、破坏细胞染色质
4、改变细胞表型
5、降低转染/转导效率
6、交叉感染其他细胞系
以上所有都会导致实验结果不可靠,重复性低!
Hs 578T细胞准备:
培养Hs 578T细胞之前必须有充足的思想准备,这株细胞非常好养,而且不能偷懒,必须勤快。细胞对氧气、密度和养分非常敏感,稍微偷懒拖一天不换液,可能就会导致细胞全部死亡的后果。只要保持换液和传代频率,多注意细胞密度,这株细胞还是可以征服的!
![QQ图片20200731181057.png QQ图片20200731181057.png](https://img1.17img.cn/17img/images/202007/uepic/cbdb4ac0-2e6a-46c1-afe4-24683245a5e0.jpg)
Hs 578T细胞培养技巧:
建议平躺着培养该细胞,以增大空气交换面积,且液体高度最好不要超过3mm,一般T25培养瓶加6-8ml培养基,T75培养瓶加15ml左右培养基即可。培养基尽量现配,配好的培养基最好两周内用完,因为叶酸不稳定易分解。
一般情况下细胞2-3天换液一次,即使培养基没有变黄。换液时轻轻侧过培养瓶/皿,不要使细胞飘起来,用巴氏吸管轻轻吸取部分上清弃去,补加等体积的新鲜培养基继续培养。或者将全部培养液转移至离心管中,1000rpm离心5min,吸去上清后用新鲜培养轻轻重悬后重新种瓶,重悬时不可吹打过度。细胞对离心和吹打比较敏感,离心和反复吹打会影响细胞状态,建议只在细胞产生大量碎片时才离心清洗。平常换液建议半换,传代可直接补加足够新鲜的培养基后直接分瓶。
细胞团长至肉眼可见,且T25瓶子有几十上百个小团时,细胞数量已经比较多,此时应该2天换液一次。当一个20倍视野有4-5个大细胞团时应该进行传代。传代时加入两倍体积的新鲜培养基后,轻轻吹打细胞团,将大的细胞团打散成小团,但不要剧烈吹打成单细胞悬液,因为单个的细胞是基本没有增殖活力的细胞,然后将混匀的细胞悬液转移至新的培养瓶中。或者将细胞悬液转移至离心管中,1000rpm离心5min后,弃去上清,加入三倍体积的新鲜培养基轻轻重悬后转移至三个新的培养瓶中。
冻存液用50%血清+40%完全培养基+10%DMSO。细胞数量应在0.5-1.0×106/ml为宜。复苏时可适当加大胎牛血清的含量,以使细胞尽快长起来。复苏后细胞需要重新聚团及较长的潜伏期,故复苏时间较长,期间应多加观察,并注意更换培养基,频率为3天一换(半换)。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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