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上海联迈生物工程有限公司
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产品介绍
RTS BL21(DE3）Chaprone助溶表达感受态细胞
| BL21(DE3)Chaprone感受态细胞中含有分子伴侣蛋白质粒，其表达产物可协助重组蛋白正确折叠形成可溶活性蛋白。分子伴侣蛋白质粒为氯霉素抗性（chloramphenicol，Cmr）的表达受控于四环素（tetR）操纵子，因此该感受态不适用于氯霉素抗性表达质粒的转化。 本BL21(DE3)Chaprone感受态细胞使用联迈生物独有的化学感受态专利技术制备，其室温可保存1个月、-20°C可保存2年（推荐保存温度）、-80°C可长期保存性能无下降。运输过程中无需干冰，可室温运输、可常规冰袋运输（推荐运输温度）。该感受态细胞为热激感受态细胞，转用于蛋白表达（不可用于克隆和载体构建），经42°C热激1min可获得105～106cfu/μg效价，可满足质粒转化要求。该制品使用简单、运输、储存方便。 | ||
组分 | ||
| 组分名称数量RTS BL21(DE3)Chaprone Competent Cell(10T)1瓶Nano E.coli Transfection Reagent1 ml | ||
储存 | ||
| RTS系列感受态为干粉形式，均可室温保存3天，长期保存-20°C（2年）。经Nano E.coli Transfection Reagent溶解后的感受态必须分装后，并于-60°C以下保存。溶解后的感受态细胞避免反复冻融，在-60°C以下可保存6个月。 | ||
使用方法 | ||
| 1. 从-20°C冰箱中取出Nano E.coli Transfection Reagent彻底融化，放置于冰上。取300 μl Nano E.coli Transfection Reagent加入到一支冻干感受态细胞中，并分装到10支1.5 ml EP管中（每支30 μl），于-60°C以下保存（或立即使用）。 2. 将10～100 ng质粒DNA（不可使用连接产物、不可使用氯霉素筛选标记质粒）加入到分装的感受态细胞中，轻弹EP管（或枪头轻轻吹打），置于冰上15min。 3. 置于42°C热激1 min后，迅速置于冰上急冷2 min。 4. 热激完毕后，向上述感受态细胞中加入450 μL不含抗生素的SOC（或LB）培养基，37°C振荡（225 rpm）培养60 min。使质粒上抗性标记基因表达，菌体复苏。 5. 取200 μl复苏菌液涂布到含相应抗生素的LB琼脂平板表面。（含相应质粒抗生素和20 μg/ml氯霉素） 6. 将平板置于37 °C培养，12~18小时后可出现菌落。 7. 挑选生长良好的菌落，接入LB培养基（含相应质粒抗生素，20 μg/ml氯霉素），37℃剧烈振荡培养过夜。 8. 1/50比例接入新的LB培养基（含相应质粒抗生素，20 μg/ml氯霉素，0.5 mg/ml L-阿拉伯糖）37 ℃剧烈振荡培养至菌体密度OD600约0.3（约2h）。 9. 加入终浓度2 ng/ml四环素（诱导chaprone伴侣蛋白表达），37℃剧烈振荡培养至OD600约0.5（约2~4h）。 10. 加入适量IPTG(0.1-1 mM), 15℃振荡培养24h（培养摇床无法制冷条件下，室温诱导8～12h）。 11. 4,000 rpm室温离心15 min，收集细胞，进行蛋白表达和可溶性表达分析。 |
RTS BL21(DE3）Chaprone助溶表达感受态细胞信息由上海联迈生物工程有限公司为您提供，如您想了解更多关于RTS BL21(DE3）Chaprone助溶表达感受态细胞报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。除供应RTS BL21(DE3）Chaprone助溶表达感受态细胞外，上海联迈生物工程有限公司还可为您提供TAPA1试剂盒；人抗增生抗体靶分子1(TAPA1)ELISA试剂盒、巢蛋白/神经上皮干细胞蛋白抗体、巢蛋白/神经上皮干细胞蛋白抗体等产品，公司有专业的客户服务团队，是您值得信赖的合作伙伴。
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工商信息
企业名称
上海联迈生物工程有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
310117003747946
成立日期
2017-09-26
注册资本
100
经营范围
从事生物科技、医疗科技领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让,仪器仪表、机电设备、机械设备、玻璃制品、电子产品、一类医疗器械、化工产品及原料(除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用爆炸物品、易制毒化学品)的销售。【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】
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