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上海联迈生物工程有限公司
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产品介绍
Gibson无缝连接试剂盒
| Gibson无缝连接试剂盒是一种混合酶系统，其可将任意方法线性化的载体和与其两端具有重叠区域的一个或多个PCR片段定向重组连接。该方法不依赖于T4 DNA连接酶，不受载体和目的片段的酶切位点限制，可在30分钟内实现PCR片段高效定向无缝克隆至载体的任意位置，从而获得完整的双链DNA分子。该试剂盒使用简单，只需加入合适比例的载体和PCR片段在50℃孵育15-30min即可完成片段的连接。 | ||||
优势 | ||||
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原理 | ||||
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组分 | ||||
| 组分名称10T50T2XGibson Assemble Mix50μl250μl | ||||
储存 | ||||
| -20℃可保存2年，-80℃可保存5年，避免反复冻融。 | ||||
检测效果和应用实例 | ||||
| 1. KpnI/HindIII酶切pCold-sumo-M vector获得线性化载体，插入与载体有25nt同源臂的引物扩增Gp32基因（966bp），然后应用2xGiboson Assembly Mix连接线性化载体和Gp32，50℃孵育15min，然后取5μl连接产物转化DH5a感受态细胞，涂板过夜后菌检。其中左图为长斑情况对比，A为对照（不加片段）B为实验组（Gp32片段），右图为挑取32个斑进行PCR扩增后电泳，其中阳性检出率为31/32(~97%)。2.PCR 扩增pCold-sumo-M vector获得线性化载体，插入与载体有15nt同源臂的引物扩增Bsu基因（1.4kb），然后应用2xGiboson Assembly Mix连接线性化载体和Bst，50℃孵育30min，然后取5μl连接产物转化DH5a感受态细胞，涂板过夜后菌检。其中左图为长斑情况对比，A为对照（不加片段）B为实验组（Bsu片段），右图为挑取40个斑进行PCR扩增后电泳，其中阳性检出率为40/40(~100)。3. KpnI/HindIII酶切pCold-sumo-M vector获得线性化载体，插入与载体有25nt同源臂的引物扩增Gp32基因（966bp），加入的载体与片段的摩尔比分别是1:1、1:2、1:3的长斑情况对比，其中1:3时长斑数量最多，三者菌检阳性率无显著差异。 | ||||
Gibson无缝连接试剂盒信息由上海联迈生物工程有限公司为您提供，如您想了解更多关于Gibson无缝连接试剂盒报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。除供应Gibson无缝连接试剂盒外，上海联迈生物工程有限公司还可为您提供核突触蛋白-α抗体（N端）、巢蛋白/神经上皮干细胞蛋白抗体、糖原合酶激酶-3β抗体等产品，公司有专业的客户服务团队，是您值得信赖的合作伙伴。
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工商信息
企业名称
上海联迈生物工程有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
310117003747946
成立日期
2017-09-26
注册资本
100
经营范围
从事生物科技、医疗科技领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让,仪器仪表、机电设备、机械设备、玻璃制品、电子产品、一类医疗器械、化工产品及原料(除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用爆炸物品、易制毒化学品)的销售。【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】
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