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五味子LAMP鉴定试剂盒
Fructus schisandrae chinensis
规格：50次
产品及特点
聚合酶链式反应(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合...”它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增五味子，与其他植物没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
规格及成分
成分 | 编号 | 十孔盒包装 |
PCR MagicMix 3.0 | 1 | 1 mL（红盖） |
超纯水 | 2 | 1 mL（亮黄色） |
五味子LAMP 引物混合液 | 3 | 100 μL（白盖） |
五味子 LAMP 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 4 | 50 μL（黄盖） |
核酸释放剂（试用装） | 5 | 20 次（1 mL，绿盖） |
使用手册 | 6 | 1 份 |
运输及保存：低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：样品 DNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送20 次核酸释放剂试用装，其使用手册可以从本公司网站订购核酸释放剂。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加 10μL 五味子 LAMP 阳性对照的 1000 倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 | N+2 个样品管 | PCR 阴性对照 | PCR 阳性对照 |
PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
五味子LAMP引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | -- | -- |
PCR 阴性对照（水） | -- | 18 μL | -- |
PCR 阳性对照（五味子 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液） | -- | -- | 18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应（35 个循环） | 95℃ | 15 sec |
57℃ | 15 sec | |
72℃ | 40 sec | |
后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
中药鉴定学
中药鉴定学主要是对中药的质量和品种进行鉴定和研究，制定出中药质量鉴定标准，寻找新的药源。中药鉴定的五大方法：性状鉴定法、基原鉴定法、生物鉴定法、理化鉴定法、显微鉴定法。
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