微量蛋白沉淀试剂盒

微量蛋白沉淀试剂盒

产品及特点 本产品用于微量沉淀浓缩蛋白质样品，其原理是通过酸使蛋白质变性，溶解度降低，在离心条件下沉淀，而达到蛋白变性、蛋白浓缩、蛋白去盐的目的。他们还有一个重要的用途是去除污染的盐离子和其他小分子。本系列产品名单如下：
它们具有下列特点：
1. 操作方便迅速，只需要混匀后离心，不需要其他仪器。
2. 产品稳定，可室温长期放置。
3. 可以处理各种液体样品（如细胞或细菌培养物，细胞裂解物，蛋白质提取物等等 ）。
4. 浓缩效果强，可浓缩浓度低达 1ug/mL 的蛋白。
5. 可用于含 SDS 的样品，但灵敏度稍低（5 ug/mL）。
6. 得到的蛋白质可用于后续的 SDS-PAGE、免疫沉淀和质谱分析等实验。但蛋白已经变性，没有活性。
运输及保存 常温运输和保存，有效期一年。
自备试剂 1M Tris-HCl，pH8.8（也许会用到）

使用方法 使用方法一（用于不含 SDS 的样品，但样品蛋白浓度不能低于 1 ug/mL）
1、 将 100 μL需要沉淀浓缩的蛋白样品转移到一个自备的1.5 mL 塑料离心管中。
2、 加入 10 μL 溶液 A，涡旋激烈震荡 10-30 秒混匀。
3、 冰上放置 15 分钟。
4、 加入 10 μL 溶液 B，轻轻混匀。
5、 冰上放置 60 分钟。
6、 4℃12000-15000×g 离心 10 分钟。
7、 小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
8、 加入 1 mL 冰浴的溶液 C，震荡混匀后 4℃12000-15000×g 离心 15 分钟。
9、 小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
10、短暂离心，小心移弃残留上清液后，将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上，空气晾干。一般需要 10 分钟左右。
11、样品放 4℃保存或立即电泳检测。可直接用 1×SDS-PAGE 上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀，取适量上样。如果蓝色的溴酚蓝染料变黄，则说明有残留酸性物质 TCA 污染，必须加少量自备的 1M Tris-HCl（pH8.8）缓冲液，直到颜色变成蓝色为止，否则将影响电泳结果。
使用方法二（用于含 SDS 的样品，但样品蛋白浓度不能低于 5 ug/mL）
1、 将 200 μL 需要沉淀浓缩的蛋白样品（浓度不低于 5ug/mL）转移到一个自备的 1.5 mL 塑料离心管中。
2、 加入 8 μL 溶液 B，涡旋激烈震荡 10-30 秒混匀。
3、 冰上放置 30 分钟或-20℃放置 15 分钟（过夜放置更好）。
4、 4℃ 12000-15000×g 离心 15 分钟。
5、 小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
6、 加入 1 mL 冰浴的溶液 C，震荡混匀后 4℃ 12000-15000×g 离心 15 分钟。
7、 小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
8、 短暂离心，小心移弃残留上清液后，将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上，空气晾干。一般需要 10 分钟左右。
9、 样品放 4℃保存或立即电泳检测。可直接用 1×SDS-PAGE 上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀，取适量上样。如果蓝色的溴酚蓝染料变黄，则说明有残留酸性物质 TCA 污染，必须加少量自备的 1M Tris-HCl（pH8.8）缓冲液，直到颜色变成蓝色为止，否则将影响电泳结果。