柱式miRNA PAGE胶回收试剂盒

柱式miRNA PAGE胶回收试剂盒

产品及特点 本产品是基因 miRNA 聚丙烯酰胺凝胶回收产 miRNABACK (CAT#:70604)的柱式升级产品，可用于回收 200 nt 以下的小片段 RNA，尤其是 20 nt 左右的microRNA(miRNA)分子。它具有下列特点:

1. 可以回收 15-3000nt 范围内的各种长度的 RNA，包括 100nt 以下的 miRNA片段。

2. 柱式回收法，比沉淀法更见简单快捷。

3. miRNA 回收率在 70%左右。

4. 一站式，即开即用，操作简单，用户不需要自备任何试剂。

5. 扩容性好，可小规模操作，也可以大规模操作。
规格及成分 成 份 编 号 50 次包装 
溶液 A LM80203A 15 mL
溶液 B LM80203B 15 mL
溶液 C LM80203C 15 mL
溶液 D LM80203D 40 mL
离心吸附柱 LM60911 50 套
通用洗柱液 LM60408 50 mL
RNA 洗脱液 LM71207 10 mL
使用手册 LM80203sc 1 份

运输及保存 常温运输,4℃保存(RNA 洗脱液最好 4℃保存)，有效期一年。

自备试剂 PAGE 胶

使用方法 

1. 切取含 miRNA 片段的 PAGE 凝胶（100 mg 左右，尽可能多地把多余的胶切除，否则会影响回收效率），放入 1.5 mL 塑料离心管中，用移液枪头尽可能将其捣碎（最好先在酒精灯上将枪头的口烧密闭再用于捣碎），捣得越细越好。

2. 加入 300 uL 溶液 A。

3. 将离心管水平放置并室温摇晃 3 小时以让 miRNA 从 PAGE 凝胶中扩散出来。如果回收的 RNA 片段长度超过 100 nt，摇晃时间应适当延长。提高温度到45-65℃，RNA 扩散速度会增加。

4. 12000-15000 g 室温离心 1-2 分钟，将含 RNA 的上清液转移到一个新的 5mL的塑料离心管中。

5. 加入 300 uL 溶液 B、300 uL 溶液 C 和 750 uL 溶液 D 混合均匀将离心管中的溶液分两次转移到离心吸附柱中，每次转移后都先静置 3 分钟，然后再12000-15000 g 离心 1 分钟，倒掉收集管中的液体。

6. 加入 700 uL 通用洗柱液于离心吸附柱中。12000-15000 g 离心 1 分钟，倒弃收集管中的废液。

7. 12000-15000 g 离心半分钟以去除离心吸附柱中的残留液体。

8. 将离心吸附柱置于一新的干净的离心管（自备）中，加入 25-50 uL RNA 洗脱液，静置 3 分钟。

9. 12000-15000 g 离心 1 分钟，离心管底部所得溶液即为纯化的 miRNA 溶液，可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。

10. 可以 PAGE 电泳检查回收效率，最好使用基因的高灵敏的超快核酸银染试剂（CAT#:81104）染色以节约 miRNA 样品的用量。