柱式血液DNAout

柱式血液DNAout

产品及特点 本产品是基于离心柱/硅胶膜原理的、专门用于从新鲜或冷冻的动物(包括人和禽类)抗凝全血中提取基因组 DNA 的试剂。它具有下列特点：

1. DNA 纯净，OD260/280 在 1.8-2.0 之间。不含蛋白质和 RNA 污染，可直接用于 PCR、酶切、杂交等。

2. 产量高，一般为 1-10 ug/mL 全血(对哺乳动物血液)。

3. 操作简单，整个过程约 20 分钟，全室温操作，适合大规模样品处理。

4. 用量广泛， 每次可以处理少达 20 uL（对禽类动物血液）， 多达 1 mL 的血液(对哺乳动物血液)。

5. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
规格及成分 成 份 编 号 大纸盒包装 
红细胞裂解液（A 型） 60403 25mL 溶液 A 60306A 25mL 离心吸附柱 60911 50 套 通用洗柱液 60408 50mL DNA 洗脱液 2.0 111205 10 mL 使用手册 60306sc 1 份

运输及保存 常温运输和保存，有效期一年

自备试剂 无

使用方法

1. 在 0.02-1 mL 新鲜或抗凝血液（冷冻血需先 37℃水浴融化）中加入 0.5 mL红细胞裂解液（A 型），吹打混匀。注意：溶液 A 非常容易长菌，取用需要在无菌条件下进行。

a) 哺乳动物，血液使用量以 300 uL 以下为宜，使用量越大产量越高，但产率会降低。如果血液多于 300 uL，重复 1-2 步两次可以提高产率。

b) 禽类动物，血液使用量以 20 uL 以下为宜，可以从第 3 步做起。

2. 室温 12,000-15,000 rpm 离心 5 分钟，沉淀呈粉红色，小心倾去上清。

3. 再短暂离心半分钟，吸弃残留的液体。此步有利于后面的细胞裂解，但一般可以省略。

4. 向有沉淀的离心管内加入 0.5 mL 溶液 A（溶液 A 有少量晶体沉淀，用前需要摇晃均匀），用移液枪吹打使沉淀充分悬浮起来。此步目的是裂解细胞，释放 DNA，所以吹打越充分越好。

5. 静置 2 分钟待溶液变清亮后，将液体转移到离心吸附柱中并静置 2-5 分钟，以使 DNA 与膜充分结合。

6. 12,000 rpm 离心半分钟，DNA 将吸附到膜上，弃收集管中的废液。

7. 加入 0.7 mL 的通用洗柱液，12,000 rpm 离心半分钟，弃收集管中的废液。

8. 加入 0.3 mL 的通用洗柱液，12,000 rpm 离心半分钟，弃收集管中的废液。

9. 12,000 rpm 离心半分钟，甩干残留液体。此步很重要，以去除膜上残留通用洗柱液，否则会影响后续反应。

10.将离心吸附柱置于一新的 1.5 mL 塑料离心管（自备）中，加入适量 30-100uLDNA 洗脱液 2.0，室温放置 2 分钟。如果将 DNA 洗脱液 2.0 在 65℃预热后再使用，洗脱 DNA 的效果会更好。

11. 12,000 rpm 离心半分钟，离心管底溶液即 DNA 溶液。可以立即使用或放冰箱长期保存。