胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) 不含酚红 100ml
产品介绍:
组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)以及传代细胞培养中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶,EDTA等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,使组织或贴壁细胞分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。
别名 | 胰酶 胰蛋白酶 |
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英文名称 | Trypsin-EDTA solution,0.25% (without phenol red) |
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CAS | 9002-07-7 |
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分子式 | C6H15O12P3 |
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分子量 | 24000 |
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储存条件 | -20℃ |
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外观(性状) | 白色或类白色 |
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单位 | 100ml/瓶 20瓶/箱 |
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保存:-20℃保存,有效期12个月。
本品含 0.25%胰酶和 0.02%EDTA(0.53mM),不含酚红,溶于无钙镁平衡盐溶液中,经过滤除菌,可以直接用于培养细胞和组织的消化。
特点:
本产品具有方便快速、稳定安全、性价比高,不影响细胞状态等特点。
使用方法:
以下操作以贴壁细胞的消化为例:
1) 吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
2) 加入少量胰蛋白酶消化液,盖过细胞即可,室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
3) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
4) 如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。
5) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
备注:本品用于组织的消化时,不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项:
1.本品长期保存需放-20℃冻存,在使用前提前取出放4℃冰箱解冻,长时间静置可能会造成颜色以及成分不均匀,请在使用前摇匀.
2 .由于每种组织或细胞性质不同,应依据具体情况,确定佳消化时间;消化细胞时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁和生长状况;
2.本产品不含抑菌剂,在使用过程中要特别注意无菌操作,避免消化液被污染;
3.解冻后液体不宜4℃长期保存,尽量避免反复冻融,小量使用时建议分装密封冻存,分装过程请注意无菌操作;
4. 为了您的安全和健康,请在注意操作安全,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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