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交链孢霉属通用染料法荧光定量PCR试剂盒

供货周期: 现货
品牌: LMAI Bio
规格: 50次
货号: LM18-73300
CAS号:
报价: ¥2490
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产品介绍

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中文名称:交链孢霉属通用染料法荧光定量PCR试剂盒

英文名称:Alternaria spp.

运输:低温运输

保存:-20℃保存

有效期:一年

货期:现货

产品介绍:聚合酶链式反应(Polymerase Chain ReactionPCR),是体外酶促合成特异DNA片段的一种经典方法,由变性、退火及适温延伸组成,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点,是分子生物学实验的最基本实验技术。

如何选择交链孢霉属通用染料法荧光定量PCR试剂盒RT-PCR是指将RNA 的反转录(RT)和cDNA 的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。利用逆转录酶将RNA逆转录(RT)成cDNAComplementary DNA),再以cDNA 为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR的常见应用包括基因检测、转录物变异检测,以及克隆和测序用cDNA模板制备。

PCR反应鉴定——PCR反应条件

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94

5   min

1

变性

94

10   sec

 

30-40

退火

50-65

20   sec

延伸

72

30   sec/kb

终延伸

72

5   min

1

注:

a)退火温度:请参考引物的理论 Tm 值,退火温度可设置低于引物理论值 2-5℃。

b)延伸时间:需要根据片段的长度来确定,对于1 kb以内的DNA片段,建议延长时间为30 sec

交链孢霉属通用染料法荧光定量PCR试剂盒常见问题与解决方法:

常见问题

可能原因

解决方法

 

 

阳性对照、待测样本均无条带。

PCR反应体系或反应条件不合适。

使用梯度PCR摸索PCR反应条件。

PCR试剂保存不当失去活性。

2× PCR Mix应保存于-20℃,使用时避免反复冻融。若使用频繁,可在4℃短时间存放。

引物设计问题。

尝试重新设计引物进行检查。

 

 

 

 

 

 

阳性对照有目的条带,待测样本无条带或条带弱。

不当储存或长期储存引起试剂活性丧失。

使用新鲜的试剂。

加入组织裂解液过量。

增大反应体系,或减少裂解液的用量。

样本裂解混合液保存不当或保存时间过久,DNA基因组已经降解。

裂解混合液液可在4℃保存2-3天,尽量使用新制备的裂解液混合液进行PCR

模板加入量不适合。

在反应体系10-20%范围内优化模板加入量。反应效性能较差时,可以降模板浓度调节到低于10%的范围。

PCR循环数不足。

适当增加PCR的循环数,推荐在35-40循环为佳。因为模板复杂,一般PCR反应要比用纯化的 DNA模板多5-10个循环为佳。

 

 

 

非特异性扩增

PCR退火温度太低,循环数、引物浓度或模板浓度太高。

增加PCR退火温度,降低PCR循环数、引物浓度或模板浓度。

PCR引物错配。

重新设计PCR引物。

配制PCR反应体系时温度太高或配制完成后放置时间太久。

PCR反应体系的配制在低温下进行,配制完成后尽快进行PCR扩增反应。

 

 

 

 

阴性对照出现目的条带

操作工具或试剂污染。

实验所有试剂或器材均应高压灭菌。操作时应小心轻柔,防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外。

样本间交叉污染。

每个取样器只对一个样本使用;或取完一个样本后,将取样器刃口浸入2%的次氯酸钠溶液中,反复涮洗,然后用干净的纸巾擦干残液。

注意事项

1. 建议使用新鲜采取的动物组织,若为长期冷冻组织,应尽量避免反复冻融,否则会导致模板的降解,影响PCR效率。

2. 试剂Buffer AL若低温保存,易产生沉淀。在使用前务必将其在室温中放置一段时间,也可在37℃水浴中预热10 min,以溶解沉淀,混匀后再使用。

3. 电泳检测时,切勿使用含有SDSLoading Buffer。否则,电泳时会在泳道中出现一大团拖尾亮带,影响实验结果。

4. 建议扩增片段长度1 kb以内,以便扩增效率佳。

5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

交链孢霉属通用染料法荧光定量PCR试剂盒运输与保存方式

冰袋运输。-20℃避光储存,有效期一年。本品避免反复冻融。建议分装保存。

相关PCR列表:

16-66000 Trypanosoma spp.锥虫通用可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-66080 Trypanosoma vivax活动锥虫可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-49600 Turlock病毒可视化RT-LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-74200 Ureaplasma urealyticum解脲脲原体可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-57500 Vaccinia Virus(VV)痘苗病毒可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-81800 Vancomycin-Resistant Enterococcus(VRE)耐万古霉素肠球菌可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-34300 Varicella-Zoster Virus(VZV)水痘-带状疱疹病毒(即人疱疹病毒3型)可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-34310 Varicella-Zoster Virus(VZV)水痘-带状疱疹病毒(即人疱疹病毒3型)野生株可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-34320 Varicella-Zoster Virus(VZV)水痘-带状疱疹病毒(即人疱疹病毒3型)疫苗株可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-11100 Variola Virus(VARV)天花病毒可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-43020 Varroa destructor狄斯瓦螨可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-43010 Varroa jacobsoni雅氏瓦螨可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-43000 Varroa spp.瓦螨通用可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-36800 Venezuelan Equine Encephalomyelitis Virus(VEEV)委内瑞拉马脑脊髓炎病毒可视化RT-LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-34400 Vesicular Stomatitis Virus(VSV)水泡性口炎病毒可视化RT-LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-14810 Vibrio alginolyticus溶藻弧菌可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-14820 Vibrio campbellii坎氏弧菌可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-14832 Vibrio cholerae霍乱弧菌O139型可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-14831 Vibrio cholerae霍乱弧菌O1型可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-14830 Vibrio cholerae霍乱弧菌通用可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-14840 Vibrio fluvialis河流弧菌可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-14850 Vibrio harveyi哈维氏弧菌可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-14860 Vibrio mimicus拟态弧菌可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-14870 Vibrio parahemolyticus副溶血性弧菌可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-14800 Vibrio spp.弧菌通用可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-14880 Vibrio vulnificus创伤弧菌可视化LAMP恒温扩增试剂盒 50次

16-53100 Viral Hemorrhagic Septicemia Virus(VHSV)病毒性出血性败血症病毒可视化RT-LAMP恒温扩增试剂盒 50次




交链孢霉属通用染料法荧光定量PCR试剂盒信息由上海联迈生物工程有限公司为您提供,如您想了解更多关于交链孢霉属通用染料法荧光定量PCR试剂盒报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应交链孢霉属通用染料法荧光定量PCR试剂盒外,上海联迈生物工程有限公司还可为您提供腺伴随病毒PCR试剂盒、加州立克次体PCR试剂盒、溶血隐秘杆菌PCR试剂盒等产品,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。
工商信息

企业名称

上海联迈生物工程有限公司

企业信息已认证

企业类型

信用代码

310117003747946

成立日期

2017-09-26

注册资本

100

经营范围

从事生物科技、医疗科技领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让,仪器仪表、机电设备、机械设备、玻璃制品、电子产品、一类医疗器械、化工产品及原料(除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用爆炸物品、易制毒化学品)的销售。【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】

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