TAT1蛋白;睾丸阴离子转运蛋白1(TAT1)重组蛋白
英文名称:Recombinant Testis Anion Transporter 1 (TAT1)
SLC26A8; Solute Carrier Family 26 Member 8; Anion exchange transporter
来源:原核表达
宿主:E.coli
规格:10μg 50μg 200μg 1mg 5mg
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)具体详见说明书
片段与标签:Thr664~Val970 with N-terminal His and GST Tag
物种来源(人、小鼠、大鼠、豚鼠、兔、猕猴、山羊、绵羊、马、牛、猪、鸡、狗等其他物种多物种)相同的名称,不同的物种。
TAT1蛋白;睾丸阴离子转运蛋白1(TAT1)重组蛋白性状:冻干粉
表达系统: 大肠杆菌
产品纯度:>90%-98%(SDS-PAGE & RP-HPLC)
保存条件:如果样品在2-4周内使用,可以在4°C低温储存。
长期储存,建议添加载体蛋白(0.1%HSA或BSA),并储存在-20~ -80°C。避免多次冻融。
TAT1蛋白;睾丸阴离子转运蛋白1(TAT1)重组蛋白的分泌表达优点:
1、一些可被细胞内蛋白酶所降解的蛋白质分泌到周质或培养基中可增加其稳定性;
2、有些在细胞内表达时无活性的蛋白分泌表达时能够按适当的方式进行准确折叠,增加到蛋白的活性;
3、 由于蛋白质信号肽和编码序列间被切割,所以分泌蛋白产物不含氨基酸起始密码子 ATG 所编码的甲硫氨酸,而甲硫氨酸会影响许多蛋白的活性。
![1.png 1.png](https://img1.17img.cn/17img/images/201901/uepic/cf82df66-d004-458b-ad02-776b2e6e4382.jpg)
TAT1蛋白;睾丸阴离子转运蛋白1(TAT1)重组蛋白和天然蛋白有什么区别:
蛋白质重组,先要全部水解为氨基酸,蛋白质的种类多就是因为它的数量大,结构复杂,空间结构千变万化。而基本的氨基酸只有20中,所以它重组以后就可能变成完全不同的东西,控制和以前完全无关的代谢过程。
基因重组只是控制同一性状表达不同而已,但是它不会改变性状的基本情况。如:控制眼睛颜色的基因,亲本的基因重组之后可能亲本为黑色,子代便为蓝色。但不会控制眼睛颜色的基因在重组之后就变成控制耳朵的基因。
TAT1蛋白;睾丸阴离子转运蛋白1(TAT1)重组蛋白分为冻干粉和溶液态两种保存形式,原核细胞表达的重组蛋白为冻干粉状态,真核细胞表达的重组蛋白为溶液态保存,这样使得重组蛋白非常稳定,在 -80℃ 条件下可保存数年。冻干粉在使用前需进行溶解,其中溶解的方法非常关键,因为溶解不好会降低蛋白的效用。溶液态保存的重组蛋白在冻融稀释使用过程中也需要仔细注意,这些都是用户在实际应用中经常遇到的问题。
(1)原核细胞表达的重组蛋白。Immune tech 大肠杆菌表达的冻干重组蛋白,已经从包涵体中提纯,添加了蛋白保护剂,使用过滤后的无菌水作为复溶剂即可,复溶冻干蛋白 100μg,用 86μl 的超纯水,轻轻摇晃使蛋白溶解,再用移液枪的枪头轻吹几下即可完全溶解,一定不能使用涡旋仪进行快速振荡或剧烈摇晃。
(2)真核细胞表达的重组蛋白。有活性的蛋白质不仅要转录和翻译,还要进行翻译后的加工,使得蛋白质的空间折叠方式维持正常,所以重组蛋白必须在真核细胞中进行,如哺乳动物细胞能够识别和去除基因中的内含子,对翻译后的蛋白质进行加工,这样表达的蛋白质具有生物活性。我们用溶液态来保存,保持了其良好的活性和稳定性。
(3)重组蛋白的保护剂。在冻干和储存过程中常用的保护剂或稳定剂有糖类,多元醇,聚合物,表面活性剂,某些蛋白和氨基酸等。我们通常加 8%(质量比体积)的海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂。海藻糖可明显阻止蛋白质二级结构改变以及冻干过程中蛋白质的伸展和聚集,甘露醇也是一种普遍应用的冻干保护剂和填充剂。