3T6-Swiss albino细胞;小鼠胚胎成纤维细胞

细胞名称：3T6-Swiss albino    小鼠胚胎成纤维细胞

组织来源：胚胎

培养条件：DMEM +10% FBS

形       态：贴壁；成纤维细胞

背       景：3T6细胞株是1963年由Todaro G和Green H从分离的瑞士小鼠胚胎中建立的，能分泌胶原和透明质酸；检测表明，鼠痘病毒阴性。

3T6-SWISS ALBINO细胞;小鼠胚胎成纤维细胞传代后不贴壁了，成团浮在培养基里，怎么办？细胞，落层生长后，消化传代，可能细胞密度大，吹打的时候有一些细胞还是成团的，可是大部分已经成单个的了，24小时后观察，细胞都成团了，不贴壁，应该没有污染。现在怎么办？重新吹打能散开吗？

技术回答：3T6-SWISS ALBINO细胞;小鼠胚胎成纤维细胞密度过大细胞老化了，消化后聚团不贴壁说明细胞状态不好，建议重新复苏细胞。如果不甘心可以重新吹散了试试看，不过估计贴壁的也很少。可以低俗离心把状态不好的聚团细胞去除，然后把上层液体里面的细胞转移至6孔板或者24孔板培养，具体根据最后分散细胞的数量来哦~

重新吹打了3T6-SWISS ALBINO细胞;小鼠胚胎成纤维细胞，还是有很多贴壁的细胞，可是还是有好多细胞碎片浮着，换了液还是有好多浮着。另外，培养瓶老是弄不均匀，就瓶子的四边都很密集，其他就很均匀，不知道会不会影响细胞状态？

技术回答：密集的地方容易老化，对3T6-SWISS ALBINO细胞;小鼠胚胎成纤维细胞整体状态还是会有影响的~ 得想办法让传代的细胞均匀分布。传代完后做一下前后左右的十字运动~

细胞处理：细胞如果裂解后，RNA在普通环境下会很快降解。想要不降解，可以考虑：1.加T-Zol裂解液，-80度保存；2.分选后按细胞冻存步骤冻存，存于-80度，应该能放3-6个月。

3T6-SWISS ALBINO细胞;小鼠胚胎成纤维细胞培养：图片聚焦没聚准，聚团现象不是很严重，状态看着也还行。悬浮细胞对血清要求较高，可以考虑换好点的血清看看。

Cell Culture Reagents

OsrHSA rHSA重组人血清白蛋白Recombinant Human Serum Albumin1 g

0010FBS胎牛血清Fetal Bovine Serum, Human Cell Tested10 ml

0025FBS胎牛血清Fetal Bovine Serum, Human Cell Tested25 ml

0103T/E胰酶/EDTA消化液Trypsin/EDTA solution100 ml

0113TNS胰酶中和液Trypsin Neutralization Solution100 ml

0113-sfTNS-sf 胰酶中和液-无血清TNS-sf (Trypsin Neutralization Solution-serum free)100 ml

0123ECDS非酶细胞裂解液Enzyme-Free Cell Dissociation Solution100 ml

0133CFM细胞冻存液Cell Freezing Medium50 ml

0143SF-CFM无血清细胞冻存液  Serum-Free Cell Freezing Medium50 ml

0153StemCryo人胚胎干细胞冻存液Human Pluripotent Stem Cell Cryopreservation Medium50ml

0163StemCryo人胚胎干细胞冻存液Human Pluripotent Stem Cell Cryopreservation Medium,5 x 10mL 

0173STI大豆胰蛋白酶抑制剂Soybean Trypsin Inhibitor50ml

0203TB台盼蓝Trypan Blue, 0.4%50 ml

0303DPBS磷酸盐缓冲液 Dulbecco’s Phosphate-Buffered Saline500 ml

0313HBSS平衡盐溶液 Hank's Balanced Salt Solution500 ml

0403PLL多聚赖氨酸 Poly-L-Lysine 1 mg/ml1 ml

0413PLL多聚赖氨酸 Poly-L-Lysine 10 mg/ml1 ml