WI38/VA13细胞;SV-40Z转化肺成纤维细胞

细胞名称：WI38/VA13     SV-40Z转化肺成纤维细胞

培养条件：MEM +10% FBS

形　　态：贴壁；上皮细胞样

背　　景：该细胞1964年建系，源自3个月胎龄的女性胚胎的肺成纤维细胞，经SV-40转化。

WI38/VA13细胞;SV-40Z转化肺成纤维细胞传代后不贴壁了，成团浮在培养基里，怎么办？细胞，落层生长后，消化传代，可能细胞密度大，吹打的时候有一些细胞还是成团的，可是大部分已经成单个的了，24小时后观察，细胞都成团了，不贴壁，应该没有污染。现在怎么办？重新吹打能散开吗？

技术回答：WI38/VA13细胞;SV-40Z转化肺成纤维细胞密度过大细胞老化了，消化后聚团不贴壁说明细胞状态不好，建议重新复苏细胞。如果不甘心可以重新吹散了试试看，不过估计贴壁的也很少。可以低俗离心把状态不好的聚团细胞去除，然后把上层液体里面的细胞转移至6孔板或者24孔板培养，具体根据最后分散细胞的数量来哦~

重新吹打了WI38/VA13细胞;SV-40Z转化肺成纤维细胞，还是有很多贴壁的细胞，可是还是有好多细胞碎片浮着，换了液还是有好多浮着。另外，培养瓶老是弄不均匀，就瓶子的四边都很密集，其他就很均匀，不知道会不会影响细胞状态？

技术回答：密集的地方容易老化，对WI38/VA13细胞;SV-40Z转化肺成纤维细胞整体状态还是会有影响的~ 得想办法让传代的细胞均匀分布。传代完后做一下前后左右的十字运动~

细胞处理：细胞如果裂解后，RNA在普通环境下会很快降解。想要不降解，可以考虑：1.加T-Zol裂解液，-80度保存；2.分选后按细胞冻存步骤冻存，存于-80度，应该能放3-6个月。

WI38/VA13细胞;SV-40Z转化肺成纤维细胞培养：图片聚焦没聚准，聚团现象不是很严重，状态看着也还行。悬浮细胞对血清要求较高，可以考虑换好点的血清看看。

Mouse Growth Factors

122-03rmGM-CSF重组鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子"Recombinant Murine Granulocyte- Macrophage Colony Stimulating Factor

"5μg

"123-01

"rmTNF-α重组鼠肿瘤坏死因子-α"Recombinant Murine Tumor Necrosis Factor-alpha

"5μg

"123-07

"rmLIF重组鼠白血病抑制因子"Recombinant Mouse Leukemia inhibitory factor

"5μg

"124-02

"rmbFGF重组鼠成纤维细胞生长因子-碱性"Recombinant Murine Fibroblast Growth Factor-basic

"10μg

"124-07

"rmFGF-7/KGF重组鼠成纤维细胞生长因子-7"Recombinant Mouse Fibroblast Growth Factor-7

"2μg

"125-04

"rmEGF重组鼠表皮细胞生长因子"Recombinant Murine Epidermal Growth Factor

"100μg

"125-06

"rmVEGF120重组鼠血管内皮生长因子120"Recombinant Murine Vascular Endothelial Growth Factor 120

"2μg

"125-07

"rmVEGF165重组鼠血管内皮生长因子165"Recombinant Murine Vascular Endothelial Growth Factor 165

"2μg

"128-09

"rmNOGGIN重组鼠NOGGIN"Recombinant Murine NOGGIN

"5μg

"221-16

"rmCXCL16重组鼠CXCL16"Recombinant Murine CXCL16

"5μg

Growth Factors and Cytokines

Rat Growth Factors

"142-03

"rrGM-CSF重组鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子"Recombinant Rat Granulocyte- Macrophage Colony Stimulating Factor

"5μg

"143-01

"rrTNF-α重组鼠肿瘤坏死因子-α"Recombinant Rat Tumor Necrosis Factor-alpha

"5μg

"144-02

"rr bFGF重组鼠成纤维细胞生长因子-碱性"Recombinant Rat Fibroblast Growth Factor-basic

"10μg

"145-01

"rrIGF重组鼠IGF-I"Recombinant Rat IGF-I

"10μg

"145-04

"rbEGF重组鼠表皮细胞生长因子"Recombinant Rat Epidermal Growth Factor

"20μg