NCI-H23细胞;人非小细胞肺癌细胞

细胞名称：NCI-H23     人非小细胞肺癌细胞

培养条件：RPMI-1640 +10% FBS

形　　态：贴壁；上皮细胞样

背　　景：该细胞源于一位51岁患有非小细胞肺癌黑人男性患者的治疗前的肿瘤组织，表达C-myc、L-myc、v-src、v-abl、v-erb B、c-raf 1、Ha-ras、Ki-ras、N-ras RNAs；该细胞携带K-ras 12突变；p53基因246位密码子突变ATC→ATG；表达PDGF A和B链的异源mRNA；表达TGFα、TGFβ和EGFR；角蛋白 5、8和18阳性，波形蛋白阳性，神经丝蛋白阴性，左旋多巴脱氢酶阴性；据报道，在软琼脂中该细胞形成克隆的效率为9.7%。

NCI-H23细胞;人非小细胞肺癌细胞传代后不贴壁了，成团浮在培养基里，怎么办？细胞，落层生长后，消化传代，可能细胞密度大，吹打的时候有一些细胞还是成团的，可是大部分已经成单个的了，24小时后观察，细胞都成团了，不贴壁，应该没有污染。现在怎么办？重新吹打能散开吗？

技术回答：NCI-H23细胞;人非小细胞肺癌细胞密度过大细胞老化了，消化后聚团不贴壁说明细胞状态不好，建议重新复苏细胞。如果不甘心可以重新吹散了试试看，不过估计贴壁的也很少。可以低俗离心把状态不好的聚团细胞去除，然后把上层液体里面的细胞转移至6孔板或者24孔板培养，具体根据最后分散细胞的数量来哦~

重新吹打了NCI-H23细胞;人非小细胞肺癌细胞，还是有很多贴壁的细胞，可是还是有好多细胞碎片浮着，换了液还是有好多浮着。另外，培养瓶老是弄不均匀，就瓶子的四边都很密集，其他就很均匀，不知道会不会影响细胞状态？

技术回答：密集的地方容易老化，对NCI-H23细胞;人非小细胞肺癌细胞整体状态还是会有影响的~ 得想办法让传代的细胞均匀分布。传代完后做一下前后左右的十字运动~

细胞处理：细胞如果裂解后，RNA在普通环境下会很快降解。想要不降解，可以考虑：1.加T-Zol裂解液，-80度保存；2.分选后按细胞冻存步骤冻存，存于-80度，应该能放3-6个月。

NCI-H23细胞;人非小细胞肺癌细胞培养：图片聚焦没聚准，聚团现象不是很严重，状态看着也还行。悬浮细胞对血清要求较高，可以考虑换好点的血清看看。

IPS P143原代12-5/2-5,4-1,4-2APSCeasy完全培养基

IPS P154原代12-5/4-3~5-1APSCeasy完全培养基

Hum-16031601-成骨细胞3原代9-5/1-1，1-2,1-3ADMEM/F12+10%FBS

Hum-16031601-间充质细胞5原代8-1/4-4~5-3ADMEM（L）+10%FBS

Hum-16031601-韧带8原代8-1/3-1~4-3ADMEM/F12+10%FBS

Hum-16030201-滑膜4原代9-5/1-4，1-5,2-1，2-2ADMEM/F12+10%FBS

Hum-16030901-韧带4原代9-5/3-2，3-3，3-4，3-5ADMEM/F12+10%FBS

Hum-16030901-滑膜1原代9-5/4-1ADMEM/F12+10%FBS

Hum-16031601-滑膜2原代9-5/4-2，4-3ADMEM/F12+10%FBS

小鼠肾小球内皮细胞2原代9-5/4-5A内皮培养基+5%FBS

小鼠肾系膜（成纤维）2原代9-5/5-1,5-2ADMEM/F12+10%FBS

人滑膜2原代9-5/5-3，5-4ADMEM/F12+10%FBS

小鼠肾系膜（成纤维）1原代9-4/1-4ADMEM/F12+10%FBS

小鼠主动脉平滑肌1原代9-4/1-5ADMEM/F12+10%FBS

Hum-16030901-韧带1原代9-4/2-1ADMEM/F12+10%FBS

Hum-16030901-成骨细胞2原代9-4/2-2，2-3ADMEM/F12+10%FBS