MFC-GFP细胞;小鼠前胃癌细胞

细胞名称：MFC-GFP     小鼠前胃癌细胞(绿色荧光蛋白标记)

培养条件：RPMI-1640 +10% FBS +200μg/mL G418

形　　态：贴壁；上皮细胞样

背　　景：转染pEGFP-N1，稳定表达绿色荧光蛋白 

MFC-GFP细胞;小鼠前胃癌细胞传代后不贴壁了，成团浮在培养基里，怎么办？细胞，落层生长后，消化传代，可能细胞密度大，吹打的时候有一些细胞还是成团的，可是大部分已经成单个的了，24小时后观察，细胞都成团了，不贴壁，应该没有污染。现在怎么办？重新吹打能散开吗？

技术回答：MFC-GFP细胞;小鼠前胃癌细胞密度过大细胞老化了，消化后聚团不贴壁说明细胞状态不好，建议重新复苏细胞。如果不甘心可以重新吹散了试试看，不过估计贴壁的也很少。可以低俗离心把状态不好的聚团细胞去除，然后把上层液体里面的细胞转移至6孔板或者24孔板培养，具体根据最后分散细胞的数量来哦~

重新吹打了MFC-GFP细胞;小鼠前胃癌细胞，还是有很多贴壁的细胞，可是还是有好多细胞碎片浮着，换了液还是有好多浮着。另外，培养瓶老是弄不均匀，就瓶子的四边都很密集，其他就很均匀，不知道会不会影响细胞状态？

技术回答：密集的地方容易老化，对MFC-GFP细胞;小鼠前胃癌细胞整体状态还是会有影响的~ 得想办法让传代的细胞均匀分布。传代完后做一下前后左右的十字运动~

细胞处理：细胞如果裂解后，RNA在普通环境下会很快降解。想要不降解，可以考虑：1.加T-Zol裂解液，-80度保存；2.分选后按细胞冻存步骤冻存，存于-80度，应该能放3-6个月。

MFC-GFP细胞;小鼠前胃癌细胞培养：图片聚焦没聚准，聚团现象不是很严重，状态看着也还行。悬浮细胞对血清要求较高，可以考虑换好点的血清看看。

人结肠成纤维1原代5-1/5-3ADMEM/F12+10%FBS

大鼠肝内胆管上皮细胞1原代4-1/1-5A上皮完全培养基

Hum-15120202-甲C1原代2-2/5-3ADMEM/F12+10%FBS

兔软骨1原代3-2/4-1ADMEM/F12+10%FBS

小鼠膀胱平滑肌1原代5-1/5-4ADMEM/F12+10%FBS

大鼠肺动脉平滑肌1原代5-1/5-5ADMEM/F12+10%FBS

Hum-15112001-甲N2原代5-2/1-1,1-2A上皮培养基+2%FBS

Hum-15112002-甲N2原代5-2/1-3,1-4A上皮培养基+2%FBS

兔角膜上皮细胞2原代5-2/1-5，2-1A上皮培养基+2%FBS

大鼠软骨细胞2原代5-2/2-2，2-3ADMEM/F12+10%FBS

Hum-15112703-甲N2原代5-2/2-4，2-5A上皮培养基+2%FBS

Hum-15112701-胃N1原代5-2/3-1A上皮培养基+2%FBS

Hum-15112702-甲N2原代5-2/3-2，3-3A上皮培养基+2%FBS

兔角膜上皮细胞1原代5-2/3-5A上皮培养基+2%FBS

Hum-15112702-甲C2原代5-2/4-1，4-2A上皮培养基+2%FBS

Hum-15112703-甲C2原代5-2/4-3，4-4A上皮培养基+2%FBS

Hum-15120401-甲N2原代5-2/4-5，5-1组织

Hum-15120402-甲N3原代5-2/5-2，5-3,5-4组织

Hum-15120402-甲C2原代5-3/1-1，1-2组织