HSPA1A检测试剂盒

HSPA1A检测试剂盒检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗HSPA1A检测试剂盒抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的HSPA1A检测试剂盒与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗HSPA1A检测试剂盒抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗HSPA1A检测试剂盒抗体与结合在包被抗体上的HSPA1A检测试剂盒结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，HSPA1A检测试剂盒浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中HSPA1A检测试剂盒的浓度。

HSPA1A检测试剂盒灵敏度、检测范围、特异性和重复性:

●灵敏度：最小可测：0.54ng/mL

●检测范围：1.563-100ng/mL

● 特异性：可检测重组或天然的人HSPA1A检测试剂盒，且与其它相关蛋白无交叉反应。

● 重复性：板内，板间变异系数均<10%。

试剂盒内容 ：

试剂名称         数量               试剂名称        数量

96孔板(预包被)          1               96孔板覆膜               2

标准品             0.5ml×1     标准品稀释液     1.5ml×1瓶

显色剂A液        6ml×1瓶          样品稀释液         6ml×1瓶

显色剂B液        6ml×1 瓶                终止液         6ml×1瓶

酶标试剂       6ml×1瓶              密封袋            1

浓洗涤液     (30×)1×20mL          使用说明书          1

HSPA1A检测试剂盒样品收集:

1. 血清：全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检测，收集血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。

2. 血浆：抗凝剂推荐使用EDTA-Na2，样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可检测。避免使用溶血，高血脂样品。

3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会

影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

4. 细胞培养上清：取细胞培养上清于1000×g离心20分钟，除去杂质及细胞碎片。取上清检测。

5. 其它生物样?