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293A(人胚肾细胞)【通过STR鉴定】

康朗生物

2018/05/24 14:40

阅读:90

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293A(人胚肾细胞)【通过STR鉴定】

种属

年龄(性别)

胎儿

组织来源

生长特性

贴壁

细胞形态

上皮细胞样

生长培养基

DMEM高糖+10% FBS+1% P/S

培养条件

气相:空气,95%;CO2,5%

温度:37℃

传代细胞培养注意事项:

1、不要轻易改变培养液,我曾经把MEM换成1640后,细胞传几代后莫名其妙死亡。

2、如果想节省消化液,上面第2步可换成3-5mlDPBS洗,主要是去除培养瓶里会影响消化液作用的成分。

3、自配消化液一定要调PH(=7.8-8)值,并且注意分装,-20度保存,避免反复冻融,用前37度预热,消化较好较快。

4.严格的无菌操作

5.适度消化:消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。

细胞附:EDTA(0.02%乙二胺四乙酸二钠)消化液配方:EDTA 0.20g,NaCl 8.00g, KCl 0.20g, KH2PO4 0.02g, 葡萄糖 2.00g,0.5%酚红4ml,加入蒸馏水定容至1000ml。10磅20min高压灭菌,使用时调节PH值到7.4。注意EDTA不能被血清中和,使用后培养瓶要彻底清洗,否则再培养时细胞容易脱壁。

售后服务告知书

一、 收到细胞处理方法

1、 收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置若干小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100×,200×各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。

2、 收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费重发一次细胞。

3、 收到细胞后,可将培养瓶里多余的培养基收集放置于4℃备用。刚开始培养时,建议用瓶内的培养基,可补加2%的血清,待细胞状态恢复后,培养液一半用瓶内的,一半用客户自备的,使细胞逐渐适应培养条件,以免因不适应而造成生长状态不佳。

二、细胞出现问题,可重发的情况有哪些?判定标准是什么?

1、 细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;

2、 细胞污染问题,请在收到产品24小时内,给我们提出真实的实验结果,核实后重发;

3、 常温发货的细胞静置24小时后,绝大多数细胞未存活(需提供真实清晰的细胞状态照片),重发;

4、 干冰冻存发货的细胞复苏后,绝大多数细胞未存活(需提供真实清晰的细胞状态照片),重发;

5、 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时或常温发货的细胞静置4小时后并且未开封,出现污染,重发;

6、 细胞活性问题,请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果(用台盼蓝染色法鉴定细胞活力),核实后予重发;

7、 视具体情况而定。


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