ELISA测定试剂盒手工操作方法

ELISA测定试剂盒手工操作方法

ELISA测定试剂盒手工操作有浸泡式和流水冲刷式两种，浸泡式进程如下：

A、吸干或甩干孔内反响液；

B、用洗刷液过洗一遍（将洗刷液注满板孔后，即甩去）；

C、浸泡，行将洗刷液注满板孔，放置1-2分钟，间歇摇晃，浸泡时间不行随意缩短；

D、吸干孔内液体，吸干应完全，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干；

E、重复操作c和d，洗刷3-4次（或按阐明规则）。

削减ELISA测定试剂盒差错的办法

1.做试验时少说话，避免唾液掉进酶标条中。

2.参加一抗二抗需求放入37°。

3.假如一同做多个板子，多个板子别罗一同；尽量少用排枪。

4.加样时，由低浓度向高浓度加，这么削减跳孔的概率。

5.勤换枪头。

ELISA测定试剂盒操作技能的影响：

1）应保证清洁，全部操作过程中保证酶标板不触摸次氯酸，以上的办法可以使“花板”降至最低极限，然后进步检查的特异性，并得到更精确。 

2）合理安排检查量，ELISA试剂盒避免反响板过多形成洗板等待时间长。

3）加酶试剂后用吸水纸在酶标板外表轻拭吸干。

4）用洗板机洗板时，保证洗液注满各孔，洗板针疏通，洗完板后最好在吸水纸（挑选干净、无或少尘的吸水资料）上轻轻拍干，避免针口有纤维蛋白或异物，这些异物在洗板的过程中易发生拖带景象而导致“花板”的呈现。

5）严峻溶血：以HRP为符号的ELISA试剂盒测定中，残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性，催化底物显色形成假阳性。

一、移液器的运用，加样（抗体）等需求精确定量的试剂时不运用排枪，经历证实排枪很不精确，很容易跳孔，不要图廉价买低档的tips 由于ELISA不但会扩大被检查的意图蛋白，也会扩大非特异联系的杂质蛋白。

二、倍比稀释样品时，稀释倍数最好要小于10。

三、一切的装跟ELISA测定试剂盒有关试剂的容器，玻璃制品的要干烤过或许运用一次性的树脂容器。