BioSuite SEC柱

蛋白分析与鉴定

单克隆抗体与重组蛋白质越来越多的被作为生物治疗性制剂。相应的，LC和LC/MS方法也作为有力的分离技术而占据了重要地位，用于支持蛋白鉴定和稳定性测试。沃特世蛋白分离技术(PrST：Protein Separation Technology)产品包括反相、离子交换和分子筛色谱柱，能够很好的应对这些分离挑战。此外，我们基于HPLC的BioSuite、SEC、IEX、HIC和反相HPLC柱为这些大分子分离提供了杰出的色谱性能。

BioSuite SEC柱

BioSuite UHR(超高分辨，Ultra-High Resolution)、HR(高分辨，High Resolution)和标准SEC柱填料，使用了坚硬但仍可浸润的硅胶基质填料，在pH 2.5-7.5条件下稳定。如标准曲线图中所示，BioSuite SEC填料的排阻限由硅胶填料的颗粒孔径所决定。SEC的填料孔径以及色谱柱长是决定分离效率的重要参数。BioSuite 4μm粒径的UHR柱，提供最大分离效率，之后分别是BioSuite HR柱和BioSuite标准柱。为了使分析柱(如4.6mm或7.8mm内径)或制备柱(如21.5mm)的柱寿命最大化，我们推荐使用BioSuite保护柱。

使用BioSuite 250, HR 5μm SEC柱对BSA聚集体进行LC/MS分析

BioSuite分子筛色谱柱一览表

产品描述                     填料基质 柱内径     柱长     柱体积     推荐样品浓度    推荐样品体积     部件号

BioSuite 125, 4 μm UHR SEC  Silica  4.6 mm    300 mm   4.98 mL  不大于 8 mg/mL   不大于 40 μL  186002161

BioSuite 250, 4 μm UHR SEC  Silica  4.6 mm    300 mm   4.98 mL  不大于 8 mg/mL   不大于 80 μL  186002162

BioSuite UHR Guard SEC       Silica  4.6 mm    35 mm    —         —               —           186002163

BioSuite 125, 5 μm HR SEC   Silica  7.8 mm    300 mm   14.33 mL 不大于 8 mg/mL   不大于 200 μL  186002164

BioSuite 250, 5 μm HR SEC   Silica  7.8 mm    300 mm   14.33 mL 不大于 8 mg/mL   不大于 200 μL  186002165

BioSuite 450, 8 μm HR SEC   Silica  7.8 mm    300 mm   14.33 mL 不大于 8 mg/mL   不大于 200 μL  186002166

BioSuite HR Guard SEC        Silica  6 mm      40 mm    —         —               —              186002167

BioSuite 125, 10 μm SEC     Silica  7.5 mm    300 mm   13.25 mL 不大于 8 mg/mL   不大于 200 μL  186002168

BioSuite 125, 13 μm SEC     Silica  21.5 mm   300 mm   108.9 mL 不大于 8 mg/mL   不大于 1.6 mL   186002169

BioSuite 250, 10 μm SEC     Silica  7.5 mm    300 mm   13.25 mL 不大于 8 mg/mL   不大于 200 μL  186002170

BioSuite 250, 13 μm SEC     Silica  21.5 mm   300 mm   108.9 mL 不大于 8 mg/mL   不大于 1.6 mL   186002171

BioSuite 450, 13 μm SEC     Silica  7.5 mm    300 mm   13.25 mL 不大于 8 mg/mL   不大于 200 μL  186002172

BioSuite 450, 17 μm SEC     Silica  21.5 mm   300 mm   108.9 mL 不大于 8 mg/mL   不大于 1.6 mL   186002173

BioSuite Guard SEC           Silica  7.5 mm    75 mm    —         —               —           186002174

BioSuite Guard SEC           Silica  21.5 mm   75 mm    —         —               —           186002175

* 使用BSA蛋白作为标准品，含盐(0.1M氯化钠或0.1M硫酸钠)的50mM磷酸缓冲液作为洗脱液。可行的蛋白载量将由于分离洗脱液、样品复杂度以及样品中所含的蛋白种类而有所不同。总的说来，要使分辨率最大化，用稀释的蛋白样品溶液，尽可能以最小的进样量进样。

* 注意：对于BioSuite UHR SEC柱(4.6mm内径)，合适的操作流速为0.1-0.4mL/min。使用能够在此流速条件下进行操作的HPLC系统(例如Waters Alliance HPLC系统)，对获得优化的UHR SEC柱性能至关重要。

BioSuite UHR SEC柱的蛋白标准曲线

样品：甲状腺球蛋白(Thyroglobulin, MW 670,000 Da)，丙种球蛋白(Gamma globulin, MW 155,000Da)，BSA(66,330 Da)，-乳球蛋白(Beta lactoglobulin, MW 18,400 Da)，溶菌酶(Lysozyme,14,300 Da)，细胞色素C(Cytochrome C, MW 12,400 Da)，三甘氨酸(Triglycine, 

189 Da)。

色谱柱： BioSuite 250, UHR SEC, 4.6 mm x 300 mm, 4 μm

         BioSuite 125, UHR SEC, 4.6 mm x 300 mm, 4 μm

部件号： 186002162 (BioSuite 250) & 186002161 (BioSuite 125)

流动相：0.15M磷酸钠，pH 6.8

流速：  0.35 mL/min

柱温：  25 °C

检测：  UV @ 220 nm

色谱柱        球形蛋白分子量范围    支链型葡聚糖    线性PEG/PEO

BioSuite 125    5,000–150,000     1,000–30,000    500–15,000

BioSuite 250    10,000–500,000    2,000–70,000    1,000–35,000

BioSuite HR SEC柱的蛋白标准曲线

样品：甲状腺球蛋白(Thyroglobulin, MW 670,000 Da)，IgG(MW 156,000 Da)，BSA(66,330 Da)，卵清蛋白(Ovalbumin, MW 43,000 Da)，过氧化酶(Peroxidase, MW 40,200 Da)，b-乳

球蛋白(Beta lactoglobulin, MW 18,400 Da)，肌球素(Myoglobin, 16,900 Da)，核糖核酸酶(Ribonuclease A, MW 13,700 Da)，细胞色素C(Cytochrome C, MW 12,400 Da)，甘氨酸四聚物

(Glycine tetramer, 246 Da)

色谱柱： BioSuite 450, HR SEC, 7.8 mm x 300 mm, 8 μm

         BioSuite 250, HR SEC, 7.8 mm x 300 mm, 5 μm

         BioSuite 125, HR SEC, 7.8 mm x 300 mm, 5 μm

部件号： 186002166 (BioSuite 450), 186002165 (Biosuite 250), & 186002164 (BioSuite 125)

流动相：0.1M磷酸钠，pH 7.0，含有0.3M氯化钠

流速：  1.0 mL/min

柱温：  25 °C

检测：  UV @ 220 nm

色谱柱         球形蛋白分子量范围   支链型葡聚糖      线性PEG/PEO

BioSuite 125   5,000–150,000       1,000–30,000     500–15,000

BioSuite 250   10,000–500,000      2,000–70,000     1,000–35,000

BioSuite 450   20,000–1,000,000    4,000–500,000    2,000–250,000

BioSuite标准SEC柱的蛋白标准曲线

样品：甲状腺球蛋白(Thyroglobulin, MW 670,000 Da)，IgG(MW 156,000 Da)，BSA(66,330 Da)，卵清蛋白(Ovalbumin, MW 43,000 Da)，过氧化酶(Peroxidase, MW 40,200 Da)，b-乳

球蛋白(Beta lactoglobulin, MW18,400 Da)，肌球素(Myoglobin, 16,900 Da)，核糖核酸酶(Ribonuclease A, MW 13,700 Da)，细胞色素C(Cytochrome C, MW 12,400 Da)，甘氨酸四聚

物(Glycine tetramer, 246 Da)。

色谱柱： BioSuite 450, SEC, 7.5 mm x 300 mm, 13 μm

         BioSuite 250, SEC, 7.5 mm x 300 mm, 13 μm

         BioSuite 125, SEC, 7.5 mm x 300 mm, 10 μm

部件号：  186002172 (BioSuite 450), 186002170 (BioSuite 250) & 186002168 (BioSuite 125)

流动相：0.1M磷酸钠，pH 7.0，含有0.3M氯化钠

流速：  1.0 mL/min

柱温：  25 °C

检测：  UV @ 220 nm

色谱柱          球形蛋白分子量范围    支链型葡聚糖     线性PEG/PEO

BioSuite 125    5,000–150,000       1,000–30,000     500–15,000

BioSuite 250    10,000–500,000      2,000–70,000     1,000–35,000

BioSuite 450    20,000–1,000,000    4,000–500,000    2,000–250,000

我们还提供BioSuite 4.6mm、7.8mm、7.5mm内径的分析柱，以及21.5mm内径制备柱。