鸡胰岛素生长因子-2(IGF-2)ELISA试剂盒
本试剂仅供研究使用 标本:血清或血浆
试验原理:
IGF-2试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知IGF-2浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将IGF-2和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中IGF-2的活性浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制
试剂盒成份(2-8℃保存) | 96孔配置 | 48孔配置 | 配制 |
96/48份酶标板 | 1块板(96T) | 半块板(48T) | 即用型 |
塑料膜板盖 | 1块 | 半块 | 即用型 |
标准品:240pg/ml | 1瓶(0.6ml) | 1瓶(0.3ml) | 按说明书进行稀稀 |
空白对照 | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) | 即用型 |
标准品稀释缓冲液 | 1瓶(5ml) | 1瓶(2.5ml) | 即用型 |
生物素标记的抗IGF-2抗体 | 1瓶(6ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
亲和链酶素-HRP | 1瓶(10ml) | 1瓶(5.0ml) | 即用型 |
洗涤缓冲液 | 1瓶(20ml) | 1瓶(10ml) | 按说明书进行稀释 |
底物A | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
底物B | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
终止液 | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
自备材料
1. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
鸡胰岛素生长因子-2(IGF-2)ELISA试剂盒操作注意事项
1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
鸡胰岛素生长因子-2(IGF-2)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
240pg/ml | (6号标准品) | 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。 |
120pg/ml | (5号标准品) | 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液 |
60pg/ml | (4号标准品) | 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
30pg/ml | (3号标准品) | 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
15pg/ml | (2号标准品) | 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
7.5pg/ml | (1号标准品) | 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
0pg/ml | (空白对照) | 原始浓度不用稀释直接加入50ul。 |
2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
鸡胰岛素生长因子-2(IGF-2)ELISA试剂盒操作步骤
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
性能
1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与人其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
4.局限性:6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。
结果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的IGF-2标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的IGF-2含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-240pg/ml
4、敏感度: 0.1pg/ml
相关如下:
HZB592Ra 中文名称:大鼠胱天蛋白酶1(CASP1)ELISA试剂盒 英文名称:for Caspase 1 (CASP1) 规格:48T/96T
HZA738Ra 中文名称:大鼠激活蛋白C(APC)ELISA试剂盒 英文名称:for Activated Protein C (APC) 规格:48T/96T
HZB226Ra 中文名称:大鼠皮质醇结合球蛋白(CBG)ELISA试剂盒 英文名称:for Corticosteroid Binding Globulin (CBG) 规格:48T/96T
HZE765Ra 中文名称:大鼠白介素23受体(IL23R)ELISA试剂盒 英文名称:for Interleukin 23 Receptor (IL23R) 规格:48T/96T
HZJ516Ra 中文名称:大鼠卵磷脂胆固醇脂酰转移酶(LCAT)ELISA试剂盒 英文名称:for Lecithin Cholesterol Acyltransferase (LCAT) 规格:48T/96T
HZJ545Ra 中文名称:大鼠Bcl2/腺病毒E1B相互作用蛋白3(BNIP3)ELISA试剂盒 英文名称:for Bcl2/Adenovirus E1B 19kDa Interacting Protein 3 (BNIP3) 规格:48T/96T
HZC401Ra 中文名称:大鼠促肾上腺皮质素释放激素结合蛋白(CRHBP)ELISA试剂盒 英文名称:for Corticotropin Releasing Hormone Binding Protein (CRHBP) 规格:48T/96T
HZB893Ra 中文名称:大鼠血管内皮生长因子受体3(VEGFR3)ELISA试剂盒 英文名称:for Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 3 (VEGFR3) 规格:48T/96T
HZC417Ra 中文名称:大鼠肉毒碱棕榈酰基转移酶2(CPT2)ELISA试剂盒 英文名称:for Carnitine Palmitoyltransferase 2, Mitochondrial (CPT2) 规格:48T/96T
HZA422Ra 中文名称:大鼠髓鞘关联糖蛋白(MAG)ELISA试剂盒 英文名称:for Myelin Associated Glycoprotein (MAG) 规格:48T/96T
HZC228Ra 中文名称:大鼠密封蛋白(OCLN)ELISA试剂盒 英文名称:for Occludin (OCLN) 规格:48T/96T
HZE253Ra 中文名称:大鼠脯氨酸-4-羟化酶α多肽Ⅰ(P4Hα1)ELISA试剂盒 英文名称:for Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide I (P4Ha1) 规格:48T/96T
HZG918Ra 中文名称:大鼠尿调蛋白(UMOD)ELISA试剂盒 英文名称:for Uromodulin (UMOD) 规格:48T/96T
HZB873Ra 中文名称:大鼠CD19分子(CD19)ELISA试剂盒 英文名称:for Cluster Of Differentiation 19 (CD19) 规格:48T/96T
HZM286Ra 中文名称:大鼠类固醇5α还原酶1(SRD5α1)ELISA试剂盒 英文名称:for Steroid 5 Alpha Reductase 1 (SRD5a1) 规格:48T/96T
HZC598Ra 中文名称:大鼠血管非炎性蛋白1(VNN1)ELISA试剂盒 英文名称:for Vanin 1 (VNN1) 规格:48T/96T
HZG168Ra 中文名称:大鼠Discs大同源物4(DLG4)ELISA试剂盒 英文名称:for Discs, Large Homolog 4 (DLG4) 规格:48T/96T
HZA718Ra 中文名称:大鼠β-位淀粉样前体蛋白裂解酶1(βACE1)ELISA试剂盒 英文名称:for Beta-Site APP Cleaving Enzyme 1 (bACE1) 规格:48T/96T
HZC200Ra 中文名称:大鼠早老素1(PSEN1)ELISA试剂盒 英文名称:for Presenilin 1 (PSEN1) 规格:48T/96T
企业名称
上海沪震生物科技有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
310112001371133
成立日期
2014-05-08
注册资本
1000
经营范围
上海沪震生物科技有限公司
公司地址
上海市杨浦区密云路1018号复旦科技园808室
客服电话