(1)人甘露糖受体C1样蛋白1(MRC1)检测试剂盒包被液的选择:一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时由于试验的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。应注意以下原理:由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用,这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。具体的试验还要有坚固的理论外也要实践,看一下最终可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液,还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。
(2)人甘露糖受体C1样蛋白1(MRC1)检测试剂盒封闭:继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,从而排斥ELISA后的步骤中干扰物质的再吸附。常用封闭剂有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明胶;脱脂奶粉,比较价廉,可以高浓度使用(5%-10%);还有一些稀有用到的各种动物血清(主要为了排除相似蛋白干扰)和酪蛋白等等。但最终选用什么,要依据试验具体来实践。
(3)人甘露糖受体C1样蛋白1(MRC1)检测试剂盒洗涤板:可以说在ELISA操作中,洗涤是最主要的关键技术。因为聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的,清除残留在板孔中游离的物质,以及非特异性地吸附的干扰物质,在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。所以在洗板时会有一定误差,人为因素很大(当然有条件的用洗板机除外),洗的不彻底或串了孔,对如此灵敏的ELISA系统可是不小的影响。
(4)加抗体标本(和二抗):注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用PBS稀释,也可用封闭液去稀释。如需加二抗,还要注意二抗的工作浓度,太高浪费,太低则着色浅。
(5)人甘露糖受体C1样蛋白1(MRC1)检测试剂盒显色:显色系统又很多,我们一开始做的时候,要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵,AP结合物可加叠氮钠。
每次做尽量要把阴阳空三个对照做好,如出现问题也好分析。
HZD089Mu 小鼠溶酶体酸性磷酸酶2(ACP2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Acid Phosphatase 2, Lysosomal (ACP2)
HZB280Mu 小鼠组织蛋白酶D(CTSD)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Cathepsin D (CTSD)
HZB120Mu 小鼠精氨酸酶(Arg)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Arginase (Arg)
HZB498Mu 小鼠蛋白二硫化物异构酶A2(PDIA2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Protein Disulfide Isomerase A2 (PDIA2)
HZM546Mu 小鼠Lin-28同源物A(LIN28A)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Lin-28 Homolog A (LIN28A)
HZB884Mu 小鼠受磷蛋白(PLN)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Phospholamban (PLN)
HZE676Mu 小鼠再生胰岛衍生蛋白3γ(REG3γ)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Regenerating Islet Derived Protein 3 Gamma (REG3g)
HZC773Mu 小鼠兰尼定受体1(RYR1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Ryanodine Receptor 1, Skeletal (RYR1)
HZF663Mu 小鼠核因子I/B(NFIB)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Nuclear Factor I/B (NFIB)
HZB564Mu 小鼠干扰素调节因子1(IRF1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Interferon Regulatory Factor 1 (IRF1)
HZH522Mu 小鼠肾连蛋白(NPNT)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Nephronectin (NPNT)
HZB483Mu 小鼠胰弹性蛋白酶(ELA1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Elastase 1, Pancreatic (ELA1)
HZC010Mu 小鼠蛋白Z依赖性蛋白酶抑制因子(ZPI)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Protein Z Dependent Protease Inhibitor (ZPI)
HZD696Mu 小鼠安定结合抑制因子(DBI)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Diazepam Binding Inhibitor (DBI)
HZG515Mu 小鼠肥大细胞类糜蛋白酶1(CMA1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Chymase 1, Mast Cell (CMA1)
HZB034Mu 小鼠粘蛋白4(MUC4)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Mucin 4 (MUC4)
HZB226Mu 小鼠皮质醇结合球蛋白(CBG)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Corticosteroid Binding Globulin (CBG)
HZB705Mu 小鼠防御素α1(DEFα1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Defensin Alpha 1, Neutrophil (DEFa1)
HZB345Mu 小鼠四旋蛋白30(TSPAN30)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Tetraspanin 30 (TSPAN30)
HZA363Mu 小鼠血小板内皮细胞粘附分子1(PECAM1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Platelet/Endothelial Cell Adhesion Molecule (PECAM1)
HZD822Mu 小鼠血小板反应蛋白2(THBS2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Thrombospondin 2 (THBS2)
HZH819Mu 小鼠白介素1受体辅助蛋白(IL1RAP)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Accessory Protein (IL1RAP)
HZC246Mu 小鼠磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDPK1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Phosphoinositide Dependent Protein Kinase 1 (PDPK1)
HZC150Mu 小鼠Ⅵ型胶原α1(COL6α1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Collagen Type VI Alpha 1 (COL6a1) 人甘露糖受体C1样蛋白1(MRC1)检测试剂盒
HZD761Mu 小鼠谷氨酰胺合成酶(GS)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Glutamine synthetase (GS)
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