(1)人17-β-羟基类固醇脱氢酶14(HSD17β14)检测试剂盒包被液的选择:一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时由于试验的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。应注意以下原理:由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用,这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。具体的试验还要有坚固的理论外也要实践,看一下最终可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液,还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。
(2)人17-β-羟基类固醇脱氢酶14(HSD17β14)检测试剂盒封闭:继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,从而排斥ELISA后的步骤中干扰物质的再吸附。常用封闭剂有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明胶;脱脂奶粉,比较价廉,可以高浓度使用(5%-10%);还有一些稀有用到的各种动物血清(主要为了排除相似蛋白干扰)和酪蛋白等等。但最终选用什么,要依据试验具体来实践。
(3)人17-β-羟基类固醇脱氢酶14(HSD17β14)检测试剂盒洗涤板:可以说在ELISA操作中,洗涤是最主要的关键技术。因为聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的,清除残留在板孔中游离的物质,以及非特异性地吸附的干扰物质,在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。所以在洗板时会有一定误差,人为因素很大(当然有条件的用洗板机除外),洗的不彻底或串了孔,对如此灵敏的ELISA系统可是不小的影响。
(4)加抗体标本(和二抗):注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用PBS稀释,也可用封闭液去稀释。如需加二抗,还要注意二抗的工作浓度,太高浪费,太低则着色浅。
(5)人17-β-羟基类固醇脱氢酶14(HSD17β14)检测试剂盒显色:显色系统又很多,我们一开始做的时候,要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵,AP结合物可加叠氮钠。
每次做尽量要把阴阳空三个对照做好,如出现问题也好分析。
hzB566Po 猪肝型脂肪酸结合蛋白(FABP1)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 1, Liver (FABP1) Sus scrofa; Porcine (Pig)
hzB818Po 猪血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1 (VEGFR1) Sus scrofa; Porcine (Pig)
AEB457Po 猪抗神经节苷脂M1抗体(Anti-GM1)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for Anti-Ganglioside M1 Antibody (Anti-GM1) Sus scrofa; Porcine (Pig)
hzA518Po 猪铁蛋白(FE)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for Ferritin (FE) Sus scrofa; Porcine (Pig)
hzB979Po 猪铁调素(Hepc)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for Hepcidin (Hepc) Sus scrofa; Porcine (Pig)
hzA804Po 猪胰高血糖素样肽1(GLP1)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for Glucagon Like Peptide 1 (GLP1) Sus scrofa; Porcine (Pig)
hzA816Po 猪α1-酸性糖蛋白(α1AGP)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for Alpha-1-Acid Glycoprotein (a1AGP) Sus scrofa; Porcine (Pig)
hzA710Po 猪凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for Prothrombin Fragment 1+2 (F1+2) Sus scrofa; Porcine (Pig)
hzA991Po 猪饥饿素(GHRL)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for Ghrelin (GHRL) Sus scrofa; Porcine (Pig)
hzD826Po 猪胰腺型磷脂酶A2(pPLA2)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for Phospholipase A2, Pancreas (pPLA2) Sus scrofa; Porcine (Pig)
hzA940Po 猪趋化因子C-X-C-基元受体4(CXCR4)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Receptor 4 (CXCR4) Sus scrofa; Porcine (Pig)
hzA738Po 人17-β-羟基类固醇脱氢酶14(HSD17β14)检测试剂盒猪激活蛋白C(APC)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for Activated Protein C (APC) Sus scrofa; Porcine (Pig)
hzA480Po 猪肌红蛋白(MYO)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for Myoglobin (MYO) Sus scrofa; Porcine (Pig)
hzA547Po 猪血管细胞粘附分子1(VCAM1)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for Vascular Cell Adhesion Molecule 1 (VCAM1) Sus scrofa; Porcine (Pig)
hzA780Po 猪乳铁传递蛋白(LTF)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for Lactoferrin (LTF) Sus scrofa; Porcine (Pig)
hzA485Po 猪氨基端前脑钠素(NT-ProBNP)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for N-Terminal Pro Brain Natriuretic Peptide (NT-ProBNP) Sus scrofa; Porcine (Pig)
hzB090Po 猪谷胱甘肽S转移酶π1(GSTπ1)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for Glutathione S Transferase Pi (GSTp) Sus scrofa; Porcine (Pig)
hzA100Po 猪基质金属蛋白酶2(MMP2)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 2 (MMP2) Sus scrofa; Porcine (Pig)
hzA866Po 猪甲状旁腺激素(PTH)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for Parathyroid Hormone (PTH) Sus scrofa; Porcine (Pig)
hzC918Po 猪成纤维细胞生长因子21(FGF21)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 21 (FGF21) Sus scrofa; Porcine (Pig)
hzA899Po 猪骨桥素(OPN)ELISA试剂盒规格 ELISA Kit for Osteopontin (OPN) Sus scrofa; Porcine (Pig)
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