小鼠磷脂酰丝氨酸(PS)检测试剂盒

温育是小鼠磷脂酰丝氨酸(PS)检测试剂盒测定中影响测定成败最为关键的一个因素。小鼠磷脂酰丝氨酸(PS)检测试剂盒作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合，必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比，即温度越高，则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。

温育这一步是临床小鼠磷脂酰丝氨酸(PS)检测试剂盒测定中最容易出现问题的步骤。通常目前国内ELISA商品试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟～1小时，进口ELISA试剂盒则通常为37℃ 1～2小时才能有较完全的结合，低于1小时，可能会影响测定下限。因此，关于温育，在实际测定操作中一定要注意以下几点：

（1）要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说，加完样本和/或反应试剂后，将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时，孔内温度从室温升至37℃，需要一定的时间，尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下，这段升温时间可能还比较长，而在临床实验室中，很少有人注意这个问题，通常是将微孔板一放入温箱即开始计时，这样就很容易造成实际测定中温育时间不够，弱阳性样本测不出来的问题。曾有一地处南方的血站同行提出了一个问题，就是在每一年的冬季总有那么一个多月的时间，在做HBsAg测定的室内质控中，测定由卫生部临床检验中心供应的1 ng/ml弱阳性样本时，总是测不出来，不知原因为何？这可能就与南方冬天室内温度较低有关，此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够，以致弱阳性样本测定为阴性。因此，为保证37℃下足够的温育时间，小鼠磷脂酰丝氨酸(PS)检测试剂盒临床实验室可自行确定本实验室不同季节（不同室温下）微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37℃，从而适当延长板条在温箱中的放置时间。具体的做法是，用一小温度计放置板孔反应溶液中测量观察即可。

（2）温育温度的选择。在有的ELISA试剂盒的说明书中，指出温育温度可有两种，例如，一种是37℃下1小时，另一种则为43℃下45分钟。从免疫测定的抗原抗体反应的本质来看，在较低的温度下反应较长的时间最为完全。如2～8℃下反应24小时。较高的反应温度，由于分子运动的加怜惜，反应时间缩短，这一点对分子含量较多的强阳性样本的测定没有问题，但对分子含量少的弱阳性样本则有漏检的可能。因此，我们建议在临床小鼠磷脂酰丝氨酸(PS)检测试剂盒测定中尽量使用较低温育温度较长反应时间的条件。

（3）“边缘效应”的排除。以前在使用96孔板的ELISA测定中，常发现有“边缘效应”，即外周孔显色较中心孔深，产生这种“边缘效应”的原因可能为 96孔板周孔与中心孔表面或热力学特征的不同。但有研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规 ELISA测定中，将板从室温（通常在25℃左右）置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度（如37℃），就可以很容易地排除“边缘效应”，并且可提高测定的重复性。

总而言之，在临床小鼠磷脂酰丝氨酸(PS)检测试剂盒测定中，要保证好的测定效果，可采用下述简单办法来确保温育条件，即尽量采用水浴，温育中让微孔板浮于水面上，或将浸透水的沙布放入一大饭盒中成一湿盒，放于温箱中，这样就会因为板条孔底部直接与37℃水或湿布的接触，以及水浴箱或湿盒内的高温度，而使反应溶液的温度迅速与温室平衡。

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hzG796Hu 人钴胺传递蛋白Ⅱ(TCN2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Transcobalamin II, Macrocytic Anemia (TCN2) 

hzH663Hu 人世间甲硫氨酰氨肽酶2(METAP2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Methionyl Aminopeptidase 2 (METAP2) 

hzF813Hu 人Anoctamin 6蛋白(ANO6)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Anoctamin 6 (ANO6) 

hzF173Hu 人17-β-羟基类固醇脱氢酶3(HSD17β3)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for 17-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 3 (HSD17b3) 

hzC232Hu 人C-Raf原癌基因丝苏氨酸蛋白激酶(CRAF)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for C-Raf Proto Oncogene Serine/Threonine Protein Kinase (CRAF) 

hzD824Hu 人血小板反应蛋白4(THBS4)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Thrombospondin 4 (THBS4) 

hzF839Hu 人转化受体电位阳离子通道亚家族V成员1(TRPV1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Transient ReHZptor Potential Cation Channel Subfamily V, Member 1 (TRPV1) 

hzC221Hu 人早幼粒细胞白血病蛋白(PML)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Promyelocytic Leukemia Protein (PML) 

hzF625Hu 人腱蛋白样蛋白1(CHRDL1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Chordin Like Protein 1 (CHRDL1) 

hzH536Hu 人NFKB抑制因子(NKRF)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for NFKB Repressing Factor (NKRF) 

hzM464Hu 人饥饿素-O-乙酰基转移酶(GOAT)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Ghrelin-O-Acyltransferase (GOAT) 

hzE002Hu 人CREB结合蛋白(CREBBP)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for CREB Binding Protein (CREBBP) 

hzC489Hu 人膜铁转运蛋白(FPN)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Ferroportin (FPN) 

hzG516Hu 人复制启动因子1(REPIN1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Replication Initiator 1 (REPIN1) 

hzH547Hu 人核因子相关κB结合蛋白(NFRkB)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Nuclear Factor Related To Kappa B Binding Protein (NFRkB) 

hzQ572Hu 人Discs大同源物关联蛋白5(DLGAP5)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Discs, Large Homolog Associated Protein 5 (DLGAP5) 

hzP122Hu 人无翅型MMTV整合位点家族成员5B(WNT5B)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 5B (WNT5B) 

hzU491Hu 人含动力蛋白重链域蛋白1(DNHD1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Dynein Heavy Chain Domain Containing Protein 1 (DNHD1) 

hzB790Hu 人唾液酸结合Ig样凝集素8(SIGLEC8)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 8 (SIGLEC8) 

hzC631Hu 人异粘蛋白(MTDH)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Metadherin (MTDH) 

hzD665Hu 人乙酰辅酶A乙酰转移酶2(ACAT2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for AHZtyl Coenzyme A AHZtyltransferase 2 (ACAT2) 

hzH983Hu 人线粒体甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAM)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for GlyHZrol-3-Phosphate Acyltransferase, Mitochondrial (GPAM) 

hzF212Hu 人炭疽热毒素受体2(ANTXR2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Anthrax Toxin ReHZptor 2 (ANTXR2)