小鼠磷酸二酯酶1C(PDE1C)检测试剂盒

温育是小鼠磷酸二酯酶1C(PDE1C)检测试剂盒测定中影响测定成败最为关键的一个因素。小鼠磷酸二酯酶1C(PDE1C)检测试剂盒作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合，必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比，即温度越高，则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。

温育这一步是临床小鼠磷酸二酯酶1C(PDE1C)检测试剂盒测定中最容易出现问题的步骤。通常目前国内ELISA商品试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟～1小时，进口ELISA试剂盒则通常为37℃ 1～2小时才能有较完全的结合，低于1小时，可能会影响测定下限。因此，关于温育，在实际测定操作中一定要注意以下几点：

（1）要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说，加完样本和/或反应试剂后，将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时，孔内温度从室温升至37℃，需要一定的时间，尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下，这段升温时间可能还比较长，而在临床实验室中，很少有人注意这个问题，通常是将微孔板一放入温箱即开始计时，这样就很容易造成实际测定中温育时间不够，弱阳性样本测不出来的问题。曾有一地处南方的血站同行提出了一个问题，就是在每一年的冬季总有那么一个多月的时间，在做HBsAg测定的室内质控中，测定由卫生部临床检验中心供应的1 ng/ml弱阳性样本时，总是测不出来，不知原因为何？这可能就与南方冬天室内温度较低有关，此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够，以致弱阳性样本测定为阴性。因此，为保证37℃下足够的温育时间，小鼠磷酸二酯酶1C(PDE1C)检测试剂盒临床实验室可自行确定本实验室不同季节（不同室温下）微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37℃，从而适当延长板条在温箱中的放置时间。具体的做法是，用一小温度计放置板孔反应溶液中测量观察即可。

（2）温育温度的选择。在有的ELISA试剂盒的说明书中，指出温育温度可有两种，例如，一种是37℃下1小时，另一种则为43℃下45分钟。从免疫测定的抗原抗体反应的本质来看，在较低的温度下反应较长的时间最为完全。如2～8℃下反应24小时。较高的反应温度，由于分子运动的加怜惜，反应时间缩短，这一点对分子含量较多的强阳性样本的测定没有问题，但对分子含量少的弱阳性样本则有漏检的可能。因此，我们建议在临床小鼠磷酸二酯酶1C(PDE1C)检测试剂盒测定中尽量使用较低温育温度较长反应时间的条件。

（3）“边缘效应”的排除。以前在使用96孔板的ELISA测定中，常发现有“边缘效应”，即外周孔显色较中心孔深，产生这种“边缘效应”的原因可能为 96孔板周孔与中心孔表面或热力学特征的不同。但有研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规 ELISA测定中，将板从室温（通常在25℃左右）置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度（如37℃），就可以很容易地排除“边缘效应”，并且可提高测定的重复性。

总而言之，在临床小鼠磷酸二酯酶1C(PDE1C)检测试剂盒测定中，要保证好的测定效果，可采用下述简单办法来确保温育条件，即尽量采用水浴，温育中让微孔板浮于水面上，或将浸透水的沙布放入一大饭盒中成一湿盒，放于温箱中，这样就会因为板条孔底部直接与37℃水或湿布的接触，以及水浴箱或湿盒内的高温度，而使反应溶液的温度迅速与温室平衡。

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hzC869Hu 人丝甘蛋白聚糖(SRGN)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Serglycin (SRGN) 

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hzC537Hu 人低氧上调节因子1(HYOU1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Hypoxia Up Regulated 1 (HYOU1) 

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hzC321Hu 人无孢蛋白(ASPN)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Asporin (ASPN) 

hzH337Hu 人过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PPARγC1α)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated ReHZptor Gamma Coactivator 1 Alpha (PPARgC1a) 

hzC128Hu 人Gremlin 1蛋白(GREM1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Gremlin 1 (GREM1) 

hzJ227Hu 人骺蛋白聚糖(EPYC)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Epiphycan (EPYC) 

hzC923Hu 人生长激素2(GH2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Growth Hormone 2 (GH2) 

hzC586Hu 人线粒体解偶联蛋白2(UCP2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Uncoupling Protein 2, Mitochondrial (UCP2) 

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hzD059Hu 人胰高血糖素样肽2(GLP2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Glucagon Like Peptide 2 (GLP2) 

hzA350Hu 人Ⅰ型胶原α1(COL1α1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Collagen Type I Alpha 1 (COL1a1) 

hzC157Hu 人Ⅺ型胶原α1(COL11α1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Collagen Type XI Alpha 1 (COL11a1) 

hzC517Hu 人透明质酸结合蛋白2(HABP2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Hyaluronan Binding Protein 2 (HABP2) 

hzC979Hu 人癌胚抗原相关细胞粘附分子7(HZACAM7)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Carcinoembryonic Antigen Related HZll Adhesion Molecule 7 (HZACAM7) 

hzD022Hu 人纤维蛋白原相关蛋白1(FGL1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Fibrinogen Like Protein 1 (FGL1) 

hzD744Hu 人脂解激活脂蛋白受体(LSR)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Lipolysis Stimulated Lipoprotein ReHZptor (LSR) 

hzG321Hu 人丝氨酸蛋白酶8(PRSS8)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Protease, Serine 8 (PRSS8) 

hzG720Hu 人G蛋白偶联受体37(GPR37)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for G Protein Coupled ReHZptor 37 (GPR37) 

hzG794Hu 人转钴胺素蛋白Ⅰ(TCN1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Transcobalamin I (TCN1) 

hzH179Hu 人分层蛋白(SFN)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Stratifin (SFN) 

hzD020Hu 人轻肽铁蛋白(FTL)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Ferritin, Light Polypeptide (FTL) 

hzD856Hu 人氨基乙二酸转氨酶(AADAT)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Aminoadipate Aminotransferase (AADAT)