小鼠骨涎蛋白(BSP)检测试剂盒

温育是小鼠骨涎蛋白(BSP)检测试剂盒测定中影响测定成败最为关键的一个因素。小鼠骨涎蛋白(BSP)检测试剂盒作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合，必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比，即温度越高，则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。

温育这一步是临床小鼠骨涎蛋白(BSP)检测试剂盒测定中最容易出现问题的步骤。通常目前国内ELISA商品试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟～1小时，进口ELISA试剂盒则通常为37℃ 1～2小时才能有较完全的结合，低于1小时，可能会影响测定下限。因此，关于温育，在实际测定操作中一定要注意以下几点：

（1）要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说，加完样本和/或反应试剂后，将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时，孔内温度从室温升至37℃，需要一定的时间，尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下，这段升温时间可能还比较长，而在临床实验室中，很少有人注意这个问题，通常是将微孔板一放入温箱即开始计时，这样就很容易造成实际测定中温育时间不够，弱阳性样本测不出来的问题。曾有一地处南方的血站同行提出了一个问题，就是在每一年的冬季总有那么一个多月的时间，在做HBsAg测定的室内质控中，测定由卫生部临床检验中心供应的1 ng/ml弱阳性样本时，总是测不出来，不知原因为何？这可能就与南方冬天室内温度较低有关，此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够，以致弱阳性样本测定为阴性。因此，为保证37℃下足够的温育时间，小鼠骨涎蛋白(BSP)检测试剂盒临床实验室可自行确定本实验室不同季节（不同室温下）微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37℃，从而适当延长板条在温箱中的放置时间。具体的做法是，用一小温度计放置板孔反应溶液中测量观察即可。

（2）温育温度的选择。在有的ELISA试剂盒的说明书中，指出温育温度可有两种，例如，一种是37℃下1小时，另一种则为43℃下45分钟。从免疫测定的抗原抗体反应的本质来看，在较低的温度下反应较长的时间最为完全。如2～8℃下反应24小时。较高的反应温度，由于分子运动的加怜惜，反应时间缩短，这一点对分子含量较多的强阳性样本的测定没有问题，但对分子含量少的弱阳性样本则有漏检的可能。因此，我们建议在临床小鼠骨涎蛋白(BSP)检测试剂盒测定中尽量使用较低温育温度较长反应时间的条件。

（3）“边缘效应”的排除。以前在使用96孔板的ELISA测定中，常发现有“边缘效应”，即外周孔显色较中心孔深，产生这种“边缘效应”的原因可能为 96孔板周孔与中心孔表面或热力学特征的不同。但有研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规 ELISA测定中，将板从室温（通常在25℃左右）置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度（如37℃），就可以很容易地排除“边缘效应”，并且可提高测定的重复性。

总而言之，在临床小鼠骨涎蛋白(BSP)检测试剂盒测定中，要保证好的测定效果，可采用下述简单办法来确保温育条件，即尽量采用水浴，温育中让微孔板浮于水面上，或将浸透水的沙布放入一大饭盒中成一湿盒，放于温箱中，这样就会因为板条孔底部直接与37℃水或湿布的接触，以及水浴箱或湿盒内的高温度，而使反应溶液的温度迅速与温室平衡。

HZA985Mu 小鼠P-选择素糖蛋白配体1(PSGL1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for P-Selectin Glycoprotein Ligand 1 (PSGL1) 

HZJ130Mu 小鼠V-Ets骨髓成红细胞增多症病毒E26癌基因同源物1(ETS1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for V-Ets Erythroblastosis Virus E26 Oncogene Homolog 1 (ETS1) 

HZF878Mu 小鼠分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Secreted Frizzled Related Protein 4 (SFRP4) 

HZA717Mu 小鼠次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶1(HPRT1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1) 

HZG435Mu 小鼠桥粒芯胶粘蛋白1(DSC1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Desmocollin 1 (DSC1) 

HZD424Mu 小鼠肌球蛋白ⅤA(MYO5A)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Myosin VA (MYO5A) 

HZE346Mu 小鼠兴奋性氨基酸转运蛋白2(EAAT2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Excitatory Amino Acid Transporter 2 (EAAT2) 

HZG368Mu 小鼠钠/钾离子转运ATP酶α2肽(ATP1α2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for ATPase, Na+/K+ Transporting Alpha 2 Polypeptide (ATP1a2) 

HZG371Mu 小鼠钠/钾离子转运ATP酶β1肽(ATP1β1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 1 Polypeptide (ATP1b1) 

HZG377Mu 小鼠钙离子转运ATP酶B2(ATP2B2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for ATPase, Ca++ Transporting, Plasma Membrane 2 (ATP2B2) 

HZG916Mu 小鼠泛醌细胞色素C还原酶核心蛋白Ⅱ(UQCRC2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Ubiquinol Cytochrome C Reductase Core Protein II (UQCRC2) 

HZJ599Mu 小鼠肌动蛋白相关蛋白2/3复合体亚基4(ARPC4)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Actin Related Protein 2/3 Complex Subunit 4 (ARPC4) 

HZC585Mu 小鼠尿皮质素2(UCN2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Urocortin 2 (UCN2) 

HZD140Mu 小鼠尿皮质素3(UCN3)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Urocortin 3 (UCN3) 

HZE562Mu 小鼠TATA框结合蛋白关联因子12(TAF12)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for TATA Box Binding Protein Associated Factor 12 (TAF12) 

HZF104Mu 小鼠精氨酸/丝氨酸丰富剪接因子4(SRSF4))ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Serine/Arginine Rich Splicing Factor 4 (SRSF4) 

HZE020Mu 小鼠蛋白磷酸酶3调节因子亚基1(PPP3R1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Protein Phosphatase 3, Regulatory Subunit 1 (PPP3R1) 

HZE806Mu 小鼠N-甲基-D-天氡氨酸离子能谷氨酸受体2A(GRIN2A)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Glutamate Receptor, Ionotropic, N-Methyl-D-Aspartate 2A (GRIN2A) 

HZC534Mu 小鼠组氨酸丰富糖蛋白(HRG)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Histidine Rich Glycoprotein (HRG) 

HZC944Mu 小鼠晶状体蛋白αB(CRYαB)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Crystallin Alpha B (CRYaB) 

HZC922Mu 小鼠血小板衍生生长因子受体样蛋白(PDGFRL)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Platelet Derived Growth Factor Receptor Like Protein (PDGFRL) 

HZB019Mu 小鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 4 (ANGPTL4) 

HZC842Mu 小鼠分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Secreted Frizzled Related Protein 5 (SFRP5) 

HZC840Mu 小鼠Sestrin 2蛋白(SESN2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Sestrin 2 (SESN2) 

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