小鼠丙糖磷酸异构酶1(TPI1)检测试剂盒

温育是小鼠丙糖磷酸异构酶1(TPI1)检测试剂盒测定中影响测定成败最为关键的一个因素。小鼠丙糖磷酸异构酶1(TPI1)检测试剂盒作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合，必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比，即温度越高，则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。

温育这一步是临床小鼠丙糖磷酸异构酶1(TPI1)检测试剂盒测定中最容易出现问题的步骤。通常目前国内ELISA商品试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟～1小时，进口ELISA试剂盒则通常为37℃ 1～2小时才能有较完全的结合，低于1小时，可能会影响测定下限。因此，关于温育，在实际测定操作中一定要注意以下几点：

（1）要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说，加完样本和/或反应试剂后，将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时，孔内温度从室温升至37℃，需要一定的时间，尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下，这段升温时间可能还比较长，而在临床实验室中，很少有人注意这个问题，通常是将微孔板一放入温箱即开始计时，这样就很容易造成实际测定中温育时间不够，弱阳性样本测不出来的问题。曾有一地处南方的血站同行提出了一个问题，就是在每一年的冬季总有那么一个多月的时间，在做HBsAg测定的室内质控中，测定由卫生部临床检验中心供应的1 ng/ml弱阳性样本时，总是测不出来，不知原因为何？这可能就与南方冬天室内温度较低有关，此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够，以致弱阳性样本测定为阴性。因此，为保证37℃下足够的温育时间，小鼠丙糖磷酸异构酶1(TPI1)检测试剂盒临床实验室可自行确定本实验室不同季节（不同室温下）微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37℃，从而适当延长板条在温箱中的放置时间。具体的做法是，用一小温度计放置板孔反应溶液中测量观察即可。

（2）温育温度的选择。在有的ELISA试剂盒的说明书中，指出温育温度可有两种，例如，一种是37℃下1小时，另一种则为43℃下45分钟。从免疫测定的抗原抗体反应的本质来看，在较低的温度下反应较长的时间最为完全。如2～8℃下反应24小时。较高的反应温度，由于分子运动的加怜惜，反应时间缩短，这一点对分子含量较多的强阳性样本的测定没有问题，但对分子含量少的弱阳性样本则有漏检的可能。因此，我们建议在临床小鼠丙糖磷酸异构酶1(TPI1)检测试剂盒测定中尽量使用较低温育温度较长反应时间的条件。

（3）“边缘效应”的排除。以前在使用96孔板的ELISA测定中，常发现有“边缘效应”，即外周孔显色较中心孔深，产生这种“边缘效应”的原因可能为 96孔板周孔与中心孔表面或热力学特征的不同。但有研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规 ELISA测定中，将板从室温（通常在25℃左右）置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度（如37℃），就可以很容易地排除“边缘效应”，并且可提高测定的重复性。

总而言之，在临床小鼠丙糖磷酸异构酶1(TPI1)检测试剂盒测定中，要保证好的测定效果，可采用下述简单办法来确保温育条件，即尽量采用水浴，温育中让微孔板浮于水面上，或将浸透水的沙布放入一大饭盒中成一湿盒，放于温箱中，这样就会因为板条孔底部直接与37℃水或湿布的接触，以及水浴箱或湿盒内的高温度，而使反应溶液的温度迅速与温室平衡。

hzB923Hu 人丙酮酸脱氢酶β(PDHβ)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Beta (PDHb) 

hzB930Hu 人脱铁转铁蛋白(apoTf)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Apotransferrin (apoTf) 

hzB932Hu 人甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for GlyHZraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase (GAPDH) 

hzB933Hu 人组织蛋白酶S(CTSS)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Cathepsin S (CTSS) 

hzB802Hu 人白介素32(IL32)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Interleukin 32 (IL32) 

hzB934Hu 人亮氨酸丰富α2-糖蛋白1(LRG1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Leucine Rich Alpha-2-Glycoprotein 1 (LRG1) 

hzB935Hu 人肌腱蛋白X(TNX)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Tenascin X (TNX) 

hzB937Hu 人芳香胺-N-乙酰基转移酶(AANAT)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Arylalkylamine-N-AHZtyltransferase (AANAT) 

hzB941Hu 人免疫球蛋白D(IgD)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Immunoglobulin D (IgD) 

hzB944Hu 人膜联蛋白A2(ANXA2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Annexin A2 (ANXA2) 

hzB945Hu 人表皮调节素(EREG)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Epiregulin (EREG) 

hzB947Hu 人顶体蛋白(ACR)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Acrosin (ACR) 

hzB950Hu 人Toll样受体7(TLR7)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Toll Like ReHZptor 7 (TLR7) 

hzB700Hu 人白介素17B(IL17B)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Interleukin 17B (IL17B) 

hzB957Hu 人谷胱甘肽S转移酶α2(GSTα2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Glutathione S Transferase Alpha 2 (GSTa2) 

hzB959Hu 人CD34分子(CD34)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 34 (CD34) 

hzB960Hu 人超氧化物歧化酶1(SOD1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Superoxide Dismutase 1, Soluble (SOD1) 

hzB962Hu 人发动蛋白1(DNM1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Dynamin 1 (DNM1) 

hzB373Hu 人防御素β1(DEFβ1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Defensin Beta 1 (DEFb1) 

hzB995Hu 人血幼素(HJV)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Hemojuvelin (HJV) 

hzB966Hu 人多配体蛋白聚糖1(SDC1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Syndecan 1 (SDC1) 

hzB968Hu 人载脂蛋白D(APOD)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Apolipoprotein D (APOD) 

hzB969Hu 人补体成分5(C5)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Complement Component 5 (C5) 

hzB973Hu 人血小板反应蛋白解整合素金属肽酶1(ADAMTS1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 1 (ADAMTS1) 

hzB970Hu 人补体成分8γ(C8γ)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Complement Component 8g (C8g) 

hzB974Hu 人血小板反应蛋白解整合素金属肽酶7(ADAMTS7)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 7 (ADAMTS7) 

hzB971Hu 人蛋白S(PROS)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Protein S (PROS)