人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)ELISA试剂盒这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)ELISA试剂盒相关产品系列表:
HZA888Ra 大鼠补体成分4(C4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement Component 4 (C4)
CEA796Ra 大鼠神经肽S(NPS)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Neuropeptide S (NPS)
HZA600Ra 大鼠颗粒酶B(GZMB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Granzyme B (GZMB)
HZA601Ra 大鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Myeloperoxidase (MPO)
HZA602Ra 大鼠过氧化物酶体生物合成因子2(PEX2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Peroxisomal Biogenesis Factor 2 (PEX2)
CEA607Ra 大鼠食欲素A(OXA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Orexin A (OXA)
HZB608Ra 大鼠核受体亚家族3C组成员1(NR3C1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Nuclear Receptor Subfamily 3, Group C, Member 1 (NR3C1)
HZA485Ra 大鼠氨基端前脑钠素(NT-ProBNP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for N-Terminal Pro Brain Natriuretic Peptide (NT-ProBNP)
HZB050Ra 大鼠雌激素受体α(ERα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Estrogen Receptor Alpha (ERa)
HZA791Ra 大鼠骨粘连蛋白(ON)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Osteonectin (ON)
HZA611Ra 大鼠血小板反应蛋白(THBS1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Thrombospondin 1 (THBS1)
HZA615Ra 大鼠纤溶抑制因子(TAFI)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor (TAFI)
HZA616Ra 大鼠V-Rel网状内皮增生病毒癌基因同源物A(RELA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for V-Rel Reticuloendotheliosis Viral Oncogene Homolog A (RELA)
HZB859Ra 大鼠凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lectin Like Oxidized Low Density Lipoprotein Receptor 1 (LOX1)
HZA620Ra 大鼠解整合素金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA试剂盒 ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 8 (ADAM8)
HZA780Ra 大鼠乳铁传递蛋白(LTF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lactoferrin (LTF)
HZA624Ra 大鼠肝癌源性生长因子(HDGF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Hepatoma Derived Growth Factor (HDGF)
HZA629Ra 大鼠BH3相互作用域死亡激动剂(Bid)ELISA试剂盒 ELISA Kit for BH3 Interacting Domain Death Agonist (Bid)
HZA771Ra 大鼠趋化因子C-X-C-基元配体16(CXCL16)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Ligand 16 (CXCL16)
HZA630Ra 大鼠糖原合酶激酶3α(GSK3α)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a)
HZA180Ra 大鼠Ⅳ型胶原(COL4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Collagen Type IV (COL4HZA609Ra 大鼠谷胱甘肽S转移酶α1(GSTα1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glutathione S Transferase Alpha 1 (GSTa1)
HZA637Ra 大鼠氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Hexosaminidase B Beta (HEXb)
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