人抗BB抗体(BB-Ab)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人抗BB抗体(BB-Ab)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,人抗BB抗体(BB-Ab)ELISA试剂盒这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人抗BB抗体(BB-Ab)ELISA试剂盒相关产品系列表:
HZE644Hu 人FK506结合蛋白4(FKBP4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for FK506 Binding Protein 4 (FKBP4)
HZH307Hu 人鱼精蛋白2(PRM2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Protamine 2 (PRM2)
HZG475Hu 人甘氨酸脱氢酶(GLDC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glycine Dehydrogenase (GLDC)
HZG184Hu 人胞质分裂作用因子4(DOCK4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Dedicator Of Cytokinesis 4 (DOCK4)
HZJ718Hu 人转录因子结合IGHM增强子3(TFE3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Transcription Factor Binding To IGHM Enhancer 3 (TFE3)
HZJ647Hu 人α-甲基酰基辅酶A消旋酶(αMACR)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Alpha-Methylacyl Coenzyme A Racemase (aMACR)
HEB028Hu 人白蛋白(ALB)ELISA试剂盒(酶联免疫吸附试验法,高敏) High Sensitive ELISA Kit for Albumin (ALB)
HEC036Hu 人转铁蛋白(TRF)ELISA试剂盒(酶联免疫吸附试验法,高敏) High Sensitive ELISA Kit for Transferrin (TRF)
HZB663Hu 人淋巴细胞激活基因3(LAG3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lymphocyte Activation Gene 3 (LAG3)
HZC677Hu 人嗜中性粒细胞胞浆因子1(NCF1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Neutrophil Cytosolic Factor 1 (NCF1)
HEA037Hu 人纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒(酶联免疫吸附试验法,高敏) High Sensitive ELISA Kit for Fibronectin (FN)
HEA544Hu 人免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒(酶联免疫吸附试验法,高敏) High Sensitive ELISA Kit for Immunoglobulin G (IgG)
HEA817Hu 人结合珠蛋白(Hpt)ELISA试剂盒(酶联免疫吸附试验法,高敏) High Sensitive ELISA Kit for Haptoglobin (Hpt)
HEA821Hu 人C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒(酶联免疫吸附试验法,高敏) High Sensitive ELISA Kit for C Reactive Protein (CRP)
HEB017Hu 人α2-巨球蛋白(α2M)ELISA试剂盒(酶联免疫吸附试验法,高敏) High Sensitive ELISA Kit for Alpha-2-Macroglobulin (a2M)
HZE421Hu 人Na+牛磺胆共转运多肽(NTCP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Na+ Taurocholate Cotransporting Polypeptide (NTCP)
HZE226Hu 人肌糖δ(SGCδ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Sarcoglycan Delta (SGCd)
HZQ257Hu 人封闭蛋白6(CLDN6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Claudin 6 (CLDN6)
HZA891Hu 人花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Arachidonate-15-Lipoxygenase (ALOX15)
HZB965Hu 人花生四烯酸-12-脂加氧酶(ALOX12)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Arachidonate-12-Lipoxygenase (ALOX12)
HZC092Hu 人Ⅰ类主要组织相容性复合体B(MHCB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Major Histocompatibility Complex Class I B (MHCB)
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