人抗淋巴细胞毒抗体(ALA/LCA)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人抗淋巴细胞毒抗体(ALA/LCA)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,人抗淋巴细胞毒抗体(ALA/LCA)ELISA试剂盒这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人抗淋巴细胞毒抗体(ALA/LCA)ELISA试剂盒相关产品系列表:
HZC781Hu 人转胶蛋白(TAGLN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Transgelin (TAGLN)
HZC407Hu 人隐花色素1(CRY1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cryptochrome 1 (CRY1)
HZH449Hu 人配对框基因9(PAX9)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Paired Box Gene 9 (PAX9)
HZB377Hu 人髓细胞触发受体1(IREM1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Immune Receptor Expressed On Myeloid Cells 1 (IREM1)
HZM611Hu 人POTE锚蛋白域家族成员G(POTEG)ELISA试剂盒 ELISA Kit for POTE Ankyrin Domain Family, Member G (POTEG)
HZH544Hu 人Neudesin神经营养因子(NENF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Neudesin Neurotrophic Factor (NENF)
HZB505Hu 人白介素3受体α(IL3Rα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 3 Receptor Alpha (IL3Ra)
HZD346Hu 人白介素17D(IL17D)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 17D (IL17D)
HZF709Hu 人肽基精氨酸脱亚氨酶Ⅳ(PADI4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Peptidyl Arginine Deiminase Type IV (PADI4)
HZB533Hu 人基质金属蛋白酶16(MMP16)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 16 (MMP16)
HZB430Hu 人信号素4D(SEMA4D)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Semaphorin 4D (SEMA4D)
HZK384Hu 人信号淋巴细胞激活分子家族成员7(SLAMF7)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Signaling Lymphocytic Activation Molecule Family, Member 7 (SLAMF7)
HZH358Hu 人丛状蛋白B1(PLXNB1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Plexin B1 (PLXNB1)
HZN280Hu 人食道癌相关基因4(ECRG4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Esophageal Cancer Related Gene 4 (ECRG4)
HZL630Hu 人泛素交叉反应蛋白(UCRP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ubiquitin Cross Reactive Protein (UCRP)
HZE536Hu 人内皮细胞粘附分子(ESAM)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Endothelial Cell Adhesion Molecule (ESAM)
HZN845Hu 人Epigen蛋白(EPG)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Epigen (EPG)
HZM658Hu 人防御素β103B(DEFβ103B)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Defensin Beta 103B (DEFB103B)
HZB566Hu 人肝型脂肪酸结合蛋白(FABP1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 1, Liver (FABP1)
HZD134Hu 人白介素1η(IL1η)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 1 Eta (IL1h)
HZE576Hu 人卷曲同源物6(FZD6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Frizzled Homolog 6 (FZD6)
HZG441Hu 人富酪蛋白(STATH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Statherin (STATH)
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