人乳腺癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人乳腺癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,人乳腺癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA试剂盒概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人乳腺癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA试剂盒相关产品系列表:
hz-E12176 大鼠CD3分子(CD3)ELISA试剂盒 Rat Cluster of differentiation 3,CD3 ELISAkit
hz-E12177 大鼠c-Jun氨基末端激酶(JNK)ELISA试剂盒 Rat c-Jun N-terminal kinases,JNK ELISAkit
hz-E12178 大鼠高铁血红蛋白(MHB)ELISA试剂盒 Rat Methemoglobin,MHB ELISAkit
hz-E12179 大鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒 Rat diamine oxidase,DAO ELISAkit
hz-E12180 大鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA试剂盒 Rat Melatonin,MT/MLT ELISAkit
hz-E12181 大鼠成纤维细胞生长因子10(FGF-10)ELISA试剂盒 Rat fibroblast growth factor-10,FGF-10 ELISAkit
hz-E12182 大鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA试剂盒 Rat secreted phospholipase A2,sPLA2 ELISAkit
hz-E12183 大鼠胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA试剂盒 Rat Cytosolic Phospholipase A2,cPLA2 ELISAkit
hz-E12184 大鼠Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA试剂盒 Rat Cross-linked Carboxy-terminal telopeptide of type Ⅰ collagen,ⅠCTP ELISAkit
hz-E12185 大鼠肌钙蛋白T(Tn-T)ELISA试剂盒 Rat Troponin T,Tn-T ELISAkit
hz-E12186 大鼠CD8分子(CD8)ELISA试剂盒 Rat cluster of differentiation 8,CD8 ELISAkit
hz-E12187 大鼠表皮生长因子受体(EGFR)ELISA试剂盒 Rat epidermal growth factor receptor,EGFR ELISAkit
hz-E12188 大鼠白介素2可溶性受体(IL-2sR)ELISA试剂盒 Rat soluble Interleukin 2 recepter,IL-2sR ELISAkit
hz-E12189 大鼠轴突生长诱向因子1(Ntn1)ELISA试剂盒 Rat Netrin-1,Ntn1 ELISAkit
hz-E12190 大鼠乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒 Rat Lactate Dehydrogenase,LDH ELISAkit
hz-E12191 大鼠抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG Ab)ELISA试剂盒 Rat anti-myelin associated glycoprotein antibody,MAG Ab ELISAkit
hz-E12192 大鼠Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒 Rat C-telopeptide of type Ⅰ collagen,CTX-Ⅰ ELISAkit
hz-E12193 大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA试剂盒 Rat phospho-inhibitory subunit of NF-κBα,pIKBα ELISAkit
hz-E12194 大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA试剂盒 Rat Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISAkit
hz-E12195 大鼠树突状细胞表面特异性C型凝集素-细胞间黏附分子3结合非整合素分子(DC-SIGN/CD209) Rat DC specific intercellular adhesion molecule 3-grabbing nonintegrin,DC-SIGN/CD209 ELISAkit
hz-E12196 大鼠Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)ELISA试剂盒 Rat procollagen Ⅰ N-terminal peptide,PⅠNP ELISAkit
hz-E12197 大鼠解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA试剂盒 Rat A Disintegrin And Metalloprotease 9,ADAM9 ELISAkit
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