人肿瘤标志物(CA724)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人肿瘤标志物(CA724)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)人肿瘤标志物(CA724)ELISA试剂盒来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人肿瘤标志物(CA724)ELISA试剂盒相关产品系列表:
hz-E11962 小鼠β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒 Mouse Interferon β,IFN-β/IFNB ELISAkit
hz-E11963 小鼠肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA试剂盒 Mouse Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISAkit
hz-E11964 小鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒 Mouse Serum amyloid A,SAA ELISAkit
hz-E11965 小鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒 Mouse anti-centrol and centrosome antibody,ACA ELISAkit
hz-E11966 小鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒 Mouse Haptoglobin,Hpt/HP ELISAkit
hz-E11967 小鼠16α羟基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA试剂盒 Mouse 16-αHydroxyestrogen 1,16-α OHE-1 ELISAkit
hz-E11968 小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA试剂盒 Mouse α1-Acid glycoprotein,α1-AGP ELISAkit
hz-E11969 小鼠内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒 Mouse Endothelial nitric oxide synthase 3,eNOS-3 ELISAkit
hz-E11970 小鼠胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒 Mouse cholest erolester transfer protein,CETP ELISAkit
hz-E11971 小鼠促黄体激素(LH)ELISA试剂盒 Mouse luteotropic hormone,LH ELISAkit
hz-E11972 小鼠血管紧张素原(aGT)ELISA试剂盒 Mouse angiotensinogen,aGT ELISAkit
hz-E11973 小鼠热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒 Mouse heat shock protein 60,hSP-60 ELISAkit
hz-E11974 小鼠绒毛膜促性腺激素(CG)ELISA试剂盒 Mouse Chorionic Gonadotrophin,CG ELISAkit
hz-E11975 小鼠丙二醛(MDA)ELISA试剂盒 Mouse malondialchehyche,MDA ELISAkit
hz-E11976 小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒 Mouse Super Oxidase Dimutase,SOD ELISAkit
hz-E11977 小鼠C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒 Mouse C-Peptide ELISAkit
hz-E11978 小鼠热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA试剂盒 Mouse Heat Shock Protein glycoprotein 96,HSP gp96 ELISAkit
hz-E11979 小鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒 Mouse 50% complement hemolysis,CH50 ELISAkit
hz-E11980 小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒 Mouse soluble Cluster of differentiation 86,sCD86 ELISAkit
hz-E11981 小鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒 Mouse Insulin,INS ELISAkit
hz-E11982 小鼠低氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISA试剂盒 Mouse hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α ELISAkit
hz-E11983 小鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒 Mouse Neonatal Thyroxine,NN-T4 ELISAkit
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