人表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,人表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒相关产品系列表:
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hz-E12367 大鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒 Rat anti-Monocyte antibody,AMA ELISAkit
hz-E12368 大鼠氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒 Rat oxidized lowdensity lipoprotein antibody,OLAb ELISAkit
hz-E12369 大鼠抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒 Rat Anti-Smooth Muscle Antibody,ASMA ELISAkit
hz-E12370 大鼠核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒 Rat nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISAkit
hz-E12371 大鼠纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)ELISA试剂盒 Rat Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI ELISAkit
hz-E12372 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA试剂盒 Rat platelet membrane glycoprotein ⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢa ELISAkit
hz-E12373 大鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒 Rat free fatty acids,FFA ELISAkit
hz-E12374 大鼠血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA试剂盒 Rat thrombospondin 1,TSP-1 ELISAkit
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hz-E12376 大鼠叶酸(FA)ELISA试剂盒 Rat Folic acid,FA ELISAkit
hz-E12377 大鼠组蛋白H2b(histon-H2b)ELISA试剂盒 Rat histon-H2b ELISAkit
hz-E12378 大鼠N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒 Rat N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP ELISAkit
hz-E12379 大鼠糖皮质类固醇受体(GR)ELISA试剂盒 Rat glucocorticoid receptor,GR ELISAkit
hz-E12380 大鼠黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA试剂盒 Rat Luteinizing Hormone-Releasing Hormone,LHRH ELISAkit
hz-E12381 大鼠8异前列腺素(8-iso-PG)ELISA试剂盒 Rat 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISAkit
hz-E12382 大鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA试剂盒 Rat interferon-inducible protein 16,IFI16/p16 ELISAkit
hz-E12383 大鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA试剂盒 Rat Stromal cell derived factor 1a,SDF-1a ELISAkit
hz-E12384 大鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒 Rat alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISAkit
hz-E12385 大鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒 Rat myeloperoxidase,MPO ELISAkit
hz-E12386 大鼠颗粒酶B(Gzms-B)ELISA试剂盒 Rat granzymes B,Gzms-B ELISAkit
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