人免疫球蛋白A Fc段受体Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人免疫球蛋白A Fc段受体Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,人免疫球蛋白A Fc段受体Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA试剂盒在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人免疫球蛋白A Fc段受体Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA试剂盒相关产品系列表:
hz-E10665 人乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒 Human acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISAkit
hz-E10666 人5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒 Human 5-Hydroxytryptamine,5HT ELISAkit
hz-E10667 人抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒 Human Inhibin,INH-A ELISAkit
hz-E10668 人性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒 Human sex hormone-binding globulin,SHBG ELISAkit
hz-E10669 人脱氢表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA试剂盒 Human Dehydroepiandrosterone S7,DHEA-S7 ELISAkit
hz-E10670 人脱氢表雄酮(DHEA)ELISA试剂盒 Human Dehydroepiandrosterone,DHEA ELISAkit
hz-E10671 人降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒 Human calcitonin gene related peptide,CGRP ELISAkit
hz-E10672 人生长抑素(SS)ELISA试剂盒 Human Somatostatin,SS ELISAkit
hz-E10673 人生长激素释放多肽(GHRP) ELISA试剂盒 Human Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISAkit
hz-E10674 人抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒 Human inhibin B,INH-B ELISAkit
hz-E10675 人促甲状腺素释放激素(TRH)ELISA试剂盒 Human growth hormone releasing hormone,GHRH ELISAkit
hz-E10676 人褪黑素(MT)ELISA试剂盒 Human Melatonin,MT ELISAkit
hz-E10677 人6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA试剂盒 Human 6-keto-prostaglandin,6-K-PG ELISAkit
hz-E10678 人血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒 Human Thromboxane B2,TX-B2 ELISAkit
hz-E10679 人皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA试剂盒 Human Corticosterone,CORT ELISAkit
hz-E10680 人前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒 Human Prostaglandin E2,PG-E2 ELISAkit
hz-E10681 人双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒 Human Dihydrotestosterone,DHT ELISAkit
hz-E10682 人促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒 Human growth hormone releasing hormone,GHRH ELISAkit
hz-E10683 人雌激素(E)ELISA试剂盒 Human estrogen,E ELISAkit
hz-E10684 人孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒 Human Progesterone,PROG ELISAkit
hz-E10685 人超敏游离雌三醇(uE3)ELISA试剂盒 Human ultra Estriol,uE3 ELISAkit
hz-E10686 人去甲肾上腺素(NA) ELISA试剂盒 human Noradrenaline,NA ELISAkit
hz-E10687 人前列腺素F(PGF)ELISA试剂盒 human Prostaglandin F,PG-F ELISAkit
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