在小鼠神经肽Y受体Y1(NPY1R)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。小鼠神经肽Y受体Y1(NPY1R)检测试剂盒然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
实验原理
小鼠神经肽Y受体Y1(NPY1R)检测试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠神经肽Y受体Y1(NPY1R)检测试剂盒相关如下:
ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 2 (GDF2) 小鼠生长分化因子2(GDF2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Alpha-2-Glycoprotein 1, Zinc Binding (aZGP1) 小鼠锌结合α2-糖蛋白1(αZGP1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Matrilin 2 (MATN2) 小鼠母系蛋白2(MATN2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Antidiuretic Hormone (ADH) 小鼠抗利尿激素(ADH)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Preprovasopressin (VP) 小鼠精氨酸加压素原(VP)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Interleukin 5 Receptor Alpha (IL5Ra) 小鼠白介素5受体α(IL5Rα)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Nodal Homolog (NODAL) 小鼠Nodal同源物(NODAL)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Melanoma Cell Adhesion Molecule (MCAM) 小鼠黑素瘤细胞黏附分子(MCAM)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2) 小鼠血管紧张素转化酶2(ACE2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Epoxide Hydrolase 4 (EPHX4) 小鼠环氧化合物水解酶4(EPHX4)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Doublecortin Like Kinase 1 (DCLK1) 小鼠双肾上腺皮质激素样激酶1(DCLK1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Vimentin (VIM) 小鼠波形蛋白(VIM)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for X-Box Binding Protein 1 (XBP1) 小鼠X-框结合蛋白1(XBP1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Aldehyde Dehydrogenase 1 Family, Member A1 小鼠醛脱氢酶1家族成员A1(ALDH1A1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Thymidine Phosphorylase (TP) 小鼠胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Leucine Rich Alpha-2-Glycoprotein 1 (LRG1) 小鼠亮氨酸丰富α2-糖蛋白1(LRG1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Dihydropyrimidine Dehydrogenase (DPYD) 小鼠二氢嘧啶脱氢酶(DPYD)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Runt Related Transcription Factor 2 (RUNX2) 小鼠Runt相关转录因子2(RUNX2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Kallikrein 7 (KLK7) 小鼠激肽释放酶7(KLK7)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 5 (HSPA5) 小鼠70kDa热休克蛋白5(HSPA5)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Nuclear Factor Of Activated T-Cells, 小鼠激活T-细胞核因子1(NFATC1)检测试剂盒96t/48t
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