在小鼠双肾上腺皮质激素样激酶1(DCLK1)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取小鼠双肾上腺皮质激素样激酶1(DCLK1)检测试剂盒“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
实验原理
小鼠双肾上腺皮质激素样激酶1(DCLK1)检测试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠双肾上腺皮质激素样激酶1(DCLK1)检测试剂盒相关如下:
ELISA Kit for Midkine (MK) 小鼠中期因子(MK)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Gastrin (GT) 小鼠胃泌素(GT)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 34 (CD34) 小鼠CD34分子(CD34)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Trefoil Factor 3, Intestinal (TFF3) 小鼠三叶因子3(TFF3)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Low Density Lipoprotein (LDL) 小鼠低密度脂蛋白(LDL)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for High Density Lipoprotein (HDL) 小鼠高密度脂蛋白(HDL)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Calpain 1, Large Subunit (CAPN1) 小鼠钙蛋白酶1(CAPN1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Phospholipase A2, Group IID (PLA2G2D) 小鼠ⅡD组磷脂酶A2(PLA2G2D)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Phospholipase A2, Cytosolic (cPLA2) 小鼠胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Annexin A2 (ANXA2) 小鼠膜联蛋白A2(ANXA2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Mannose Binding Lectin (MBL) 小鼠甘露糖结合蛋白(MBL)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Mannose Associated Serine 小鼠甘露聚糖结合凝集素关联丝氨酸蛋白酶1(MASP1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Interleukin 35 (IL35) 小鼠白介素35(IL35)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Forkhead Box Protein P3 (FOXP3) 小鼠叉头框蛋白P3(FOXP3)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Cholecystokinin 8, Octapeptide (CCK8) 小鼠胆囊收缩素八肽(CCK8)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Coagulation Factor VIII (F8) 小鼠凝血因子Ⅷ(F8)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 15 (GDF15) 小鼠生长分化因子15(GDF15)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A7 (S100A7) 小鼠S100钙结合蛋白A7(S100A7)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Coagulation Factor XIII B Polypeptide (F13B) 小鼠凝血因子ⅩⅢB肽(F13B)检测试剂盒96t/48t
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