在小鼠组织蛋白酶D(CTSD)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,小鼠组织蛋白酶D(CTSD)检测试剂盒观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
实验原理
小鼠组织蛋白酶D(CTSD)检测试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠组织蛋白酶D(CTSD)检测试剂盒相关如下:
Mouse anti-cardiolipin antibody IgM,ACA-IgM ELISAkit 小鼠抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)检测试剂盒96t/48t
Mouse anti-cardiolipin antibody IgG,ACA-IgG ELISAkit 小鼠抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)检测试剂盒96t/48t
Mouse apelin 12,AP12 ELISAkit 小鼠apelin 12(AP12)检测试剂盒96t/48t
Mouse Interferon α,IFN-α ELISAkit 小鼠α干扰素(IFN-α)检测试剂盒96t/48t
Mouse pyruvate kinase,PK ELISAkit 小鼠丙酮酸激酶(PK)检测试剂盒96t/48t
Mouse rudimental bovine serum albumin check-up ELISAkit 小鼠的牛血清白蛋白残留检测检测试剂盒96t/48t
Mouse CA724 ELISAkit 小鼠肿瘤标志物(CA724)检测试剂盒96t/48t
Mouse coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISAkit 小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)检测试剂盒96t/48t
Mouse endotoxin,ET ELISAkit 小鼠内毒素(ET)检测试剂盒96t/48t
Mouse Atrial Natriuretic Peptide,ANP ELISAkit 小鼠心钠肽(ANP)检测试剂盒96t/48t
Mouse Peroxisome Proliferator-activated receptor 小鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ( PPAR-γ)检测试剂盒96t/48t
Mouse Cyclosporine A,CsA ELISAkit 小鼠毒性休克综合征毒素1(TSST-1)检测试剂盒96t/48t
Mouse Complement 1 inhibitor autoantibody,C1INH ELISAkit 小鼠补体1抑制物抗体(C1INH)检测试剂盒96t/48t
Mouse Cyclosporine A,CsA ELISAkit 小鼠环孢素A(CsA)检测试剂盒96t/48t
Mouse para-aminobenzoic acid,PABA ELISAkit 小鼠对氨基苯甲酸(PABA)检测试剂盒96t/48t
Mouse high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISAkit 小鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)检测试剂盒96t/48t
Mouse β2-glycoprotein 1 antibody IgA/G/M,β2-GP1 小鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)检测试剂盒96t/48t
Mouse Linker for activation of T cell,LAT ELISAkit 小鼠T细胞活化连接蛋白(LAT)检测试剂盒96t/48t
Mouse Endometrium Antibody,EMAb ELISAkit 小鼠抗子宫内膜抗体(EMAb)检测试剂盒96t/48t
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