小鼠次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶1(HPRT1)检测试剂盒

在小鼠次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶1(HPRT1)检测试剂盒中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括:

(1)　固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。

(2) 包被抗体(或抗原)的选择：将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18～24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后，小鼠次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶1(HPRT1)检测试剂盒在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg/ml。

(3)　酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。

(4)　酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入。

实验原理

小鼠次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶1(HPRT1)检测试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中

TLR水平。用纯化的抗体包被微孔

板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入

TLR抗原、生物素化的抗人

TLR抗体、HRP

标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下

转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制

小鼠次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶1(HPRT1)检测试剂盒相关如下：

Human Melanoma Marker A,MART/Melan-A ELISAkit 人黑色素瘤标记物(MART/Melan-A)检测试剂盒96t/48t

Human cytokeratin High Molecular Weight,CK-HMW ELISAkit 人高分子量细胞角蛋白(CK-HMW)检测试剂盒96t/48t

Human primary hepatic carcinoma,PHC ELISAkit 人肝癌抗原(PHC)检测试剂盒96t/48t

Human apoptosis protease activating factor-1,Apaf-1 ELISAkit 人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)检测试剂盒96t/48t

Human nasopharyngeal carcinoma,NPC ELISAkit 人鼻咽癌(NPC)检测试剂盒96t/48t

Human urinary bladder cancer antigen,UBC ELISAkit 人膀胱癌抗原(UBC)检测试剂盒96t/48t

Human pan-cytokeratin,P-CK ELISAkit 人广谱细胞角蛋白(P-CK)检测试剂盒96t/48t

Human Oncogene Protein p190/bcr-abl ELISAkitHuman Oncogene Protein 人癌基因蛋白质p190/bcr-abl 检测试剂盒96t/48t

Human Bladder tumor antigen,BTA ELISAkit 人膀胱肿瘤抗原(BTA)检测试剂盒96t/48t

Human Midkine,MK ELISAkit 人中期因子(MK)检测试剂盒96t/48t

Human BH3 interacting domain death agonist,Bid ELISAkit 人BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)检测试剂盒96t/48t

Human B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2 ELISAkit 人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)检测试剂盒96t/48t

Human Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied 人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TGSF)检测试剂盒96t/48t

Human pigment epithelium-derived factor,PEDF ELISAkit 人色素上皮衍生因子(PEDF)检测试剂盒96t/48t

Human Clara cell protein,CC16 ELISAkit 人克拉拉细胞蛋白(CC16) 检测试剂盒96t/48t

Human hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α ELISAkit 人低氧诱导因子1α(HIF-1α)检测试剂盒96t/48t

Human melanocyte antibody,MC Ab ELISAkit 人黑色素细胞抗体(MC Ab)检测试剂盒96t/48t

Human transferrin receptor,TFR ELISAkit 人转铁蛋白受体(TFR/CD71)检测试剂盒96t/48t