在小鼠核仁素(NCL)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,小鼠核仁素(NCL)检测试剂盒在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
实验原理
小鼠核仁素(NCL)检测试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠核仁素(NCL)检测试剂盒相关如下:
Human leukocyte common antigen,LCA/CD45 ELISAkit 人白细胞共同抗原(LCA/CD45)检测试剂盒96t/48t
Human cluster Of differentiation,CD4 ELISAkit 人CD4分子(CD4)检测试剂盒96t/48t
Human Placenta Cadherin,P-cad ELISAkit 人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)检测试剂盒96t/48t
Human Keratinocyte Growth Factor,KGF ELISAkit 人角化细胞生长因子(KGF)检测试剂盒96t/48t
Human Platelet-Derived Growth Factor-BB,PDGF-BB ELISAkit 人血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)检测试剂盒96t/48t
Human CXC-chemokine ligand 16,CXCL16 ELISAkit 人CXC趋化因子配体16(CXCL16)检测试剂盒96t/48t
Human CXC-chemokine receptor 3,CXCR3 ELISAkit 人CXC趋化因子受体3(CXCR3)检测试剂盒96t/48t
Human interferon-inducible protein 16,IFI16/p16 ELISAkit 人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)检测试剂盒96t/48t
Human Stromal cell derived factor 1a,SDF-1a ELISAkit 人基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)检测试剂盒96t/48t
Human lymphotactin,Lptn/LTN ELISAkit 人淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)检测试剂盒96t/48t
Human Interferon α,IFN-α ELISAkit 人α干扰素(IFN-α)检测试剂盒96t/48t
Human soluble Cluster of differentiation 86,sCD86 ELISAkit 人可溶性CD86(B7-2/sCD86)检测试剂盒96t/48t
human Interleukin 27,IL-27 ELISAkit 人白介素27(IL-27)检测试剂盒96t/48t
Human Interleukin 23,IL-23 ELISAkit 人白介素23(IL-23)检测试剂盒96t/48t
Human Macrophage Migration Inhibitory Factor,MIF ELISAkit 人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)检测试剂盒96t/48t
Human Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISAkit 人组织因子途径抑制物(TFPI)检测试剂盒96t/48t
Human interferon-inducible protein 10,IP-10 ELISAkit 人干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)检测试剂盒96t/48t
Human Interleukin 1,IL-1 ELISAkit 人白介素1(IL-1)检测试剂盒96t/48t
Human Interleukin 17,IL-17 ELISAkit 人白介素17(IL-17)检测试剂盒96t/48t
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企业名称
上海沪震生物科技有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
310112001371133
成立日期
2014-05-08
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经营范围
上海沪震生物科技有限公司
公司地址
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