在小鼠微管关联蛋白2(MAP2)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取小鼠微管关联蛋白2(MAP2)检测试剂盒“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
实验原理
小鼠微管关联蛋白2(MAP2)检测试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠微管关联蛋白2(MAP2)检测试剂盒相关如下:
ELISA Kit for Alanine Aminotransferase (ALT) 人谷丙转氨酶(ALT)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Dihydrolipoyl Dehydrogenase (DLD) 人二氢硫辛酸脱氢酶(DLD)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Adiponectin (ADP) 人脂联素(ADP)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Interleukin 18 (IL18) 人白介素18(IL18)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Growth Hormone Releasing Hormone (GHRH) 人促生长激素释放激素(GHRH)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Connective Tissue Growth Factor (CTGF) 人结缔组织生长因子(CTGF)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Tissue Factor (TF) 人组织因子(TF)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Plasminogen Activator, Tissue (tPA) 人组织型纤溶酶原激活因子(tPA)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Immunoglobulin G3 (IgG3) 人免疫球蛋白G3(IgG3)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Procollagen II N-Terminal Propeptide (PIINP) 人Ⅱ型前胶原氨基端原肽(PⅡNT)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Oxidized Low Density Lipoprotein (OxLDL) 人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Platelet Derived Growth Factor Subunit A (PDGFA) 人血小板衍生生长因子A(PDGFA)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Thrombomodulin (TM) 人血栓调节蛋白(TM)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Fibrinogen Degradation Product (FDP) 人纤维蛋白原降解产物(FDP)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Plasminogen Activator Inhibitor 2 (PAI2) 人纤溶酶原激活物抑制因子2(PAI2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Plasminogen Activator Inhibitor 1 (PAI1) 人纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 3 (ICAM3) 人细胞间粘附分子3(ICAM3)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 2 (ICAM2) 人细胞间粘附分子2(ICAM2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Enolase, Neuron Specific (NSE) 人神经元特异性烯醇化酶(NSE)检测试剂盒96t/48t
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