在小鼠芳香烃受体(AhR)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,小鼠芳香烃受体(AhR)检测试剂盒观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
实验原理
小鼠芳香烃受体(AhR)检测试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠芳香烃受体(AhR)检测试剂盒相关如下:
ELISA Kit for Lipase, Hormone Sensitive (LIPE) 人激素敏感性脂肪酶(LIPE)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 7, Brain (FABP7) 人脑型脂肪酸结合蛋白(FABP7)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Tissue Polypeptide Specific Antigen (TPS) 人组织多肽特异性抗原(TPS)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7 (Smad7) 人Smad同源物7(Smad7)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Mothers Against Decapentaplegic Homolog 1 (Smad1) 人Smad同源物1(Smad1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Von Willebrand Factor A Domain Containing 人含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Cross Linked N-Telopeptide Of Type I Collagen 人Ⅰ型胶原交联氨基端肽(NTXⅠ)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Secretory Immunoglobulin A (sIgA) 人分泌型免疫球蛋白A(sIgA)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Heat Shock 27kDa Protein 1 (HSPB1) 人27kDa热休克蛋白(HSPB1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for CCAAT/Enhancer Binding Protein Alpha (CEBPa) 人CCAAT增强子结合蛋白α(CEBPα)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Kallikrein 6 (KLK6) 人激肽释放酶6(KLK6)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Kallikrein 8 (KLK8) 人激肽释放酶8(KLK8)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Advanced Glycosylation End Product Specific 人晚期糖基化终末产物受体(AGER)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for ATP Binding Cassette Transporter G1 (ABCG1) 人ATP结合盒转运蛋白G1(ABCG1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for V-Myc Myelocytomatosis Viral Oncogene 人V-Myc骨髓细胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for V-Fos FBJ Murine Osteosarcoma Viral 人V-Fos-FBJ骨肉瘤病毒癌基因同源物(FOS)检测试剂盒96t/48t
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企业名称
上海沪震生物科技有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
310112001371133
成立日期
2014-05-08
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1000
经营范围
上海沪震生物科技有限公司
公司地址
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