在小鼠凝血因子Ⅴ(F5)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,小鼠凝血因子Ⅴ(F5)检测试剂盒观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
实验原理
小鼠凝血因子Ⅴ(F5)检测试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠凝血因子Ⅴ(F5)检测试剂盒相关如下:
ELISA Kit for Glutathione S Transferase Kappa 1 (GSTk1) 人谷胱甘肽S转移酶κ1(GSTκ1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Glutathione S Transferase Pi (GSTp) 人谷胱甘肽S转移酶π1(GSTπ1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Alkaline Phosphatase, Liver/Bone/Kidney (ALPL) 人肝肾骨碱性磷酸酶(ALPL)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Bone Sialoprotein (BSP) 人骨涎蛋白(BSP)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Coagulation Factor XIII A1 Polypeptide (F13A1) 人凝血因子ⅩⅢA1肽(F13A1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Arachidonic Acid (AA) 人花生四烯酸(AA)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Low Density Lipoprotein (LDL) 人低密度脂蛋白(LDL)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Myogenin (MYOG) 人肌细胞生成素(MYOG)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 23 (FGF23) 人成纤维细胞生长因子23(FGF23)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Complement 1q (C1q) 人补体1q(C1q)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Coagulation Factor V (F5) 人凝血因子Ⅴ(F5)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Coagulation Factor XIII (F13) 人凝血因子ⅩⅢ(F13)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Coagulation Factor XII (F12) 人凝血因子Ⅻ(F12)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Trefoil Factor 2 (TFF2) 人三叶因子2(TFF2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Surfactant Associated Protein B (SPB) 人表面活性物质关联蛋白B(SPB)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Surfactant Associated Protein C (SPC) 人表面活性物质关联蛋白C(SPC)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Diamine Oxidase (DAO) 人二胺氧化酶(DAO)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Lymphocyte Function Associated Antigen 1 Alpha 人淋巴细胞功能关联抗原1α(LFA1α)检测试剂盒96t/48t
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企业名称
上海沪震生物科技有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
310112001371133
成立日期
2014-05-08
注册资本
1000
经营范围
上海沪震生物科技有限公司
公司地址
上海市杨浦区密云路1018号复旦科技园808室
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