在小鼠Ⅰ型前胶原(PCⅠ)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统小鼠Ⅰ型前胶原(PCⅠ)检测试剂盒里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
实验原理
小鼠Ⅰ型前胶原(PCⅠ)检测试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠Ⅰ型前胶原(PCⅠ)检测试剂盒相关如下:
Rabbit cholest erolester transfer protein,CETP ELISAkit 兔子胆固醇酯转移蛋白(CETP)检测试剂盒96t/48t
Rabbit soluble adhesion molecules,Sam ELISAkit 兔子可溶性粘附分子(Sam)检测试剂盒96t/48t
Rabbit anti-neutrophil granules antibody,ANGA ELISAkit 兔子抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)检测试剂盒96t/48t
Rabbit Progesterone,PROG ELISAkit 兔子孕激素/孕酮(PROG)检测试剂盒96t/48t
Rabbit Collagenase Type II ELISAkit 兔子胶原酶II(Collagenase II)检测试剂盒96t/48t
Rabbit tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 兔子胶原酶I(Collagenase I)检测试剂盒96t/48t
Rabbit tumor necrosis factor-related apoptosis- 兔子肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)检测试剂盒96t/48t
Rabbit Macrophage Inflammatory Protein-1α,MIP-1α 兔子巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)检测试剂盒96t/48t
Rabbit glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISAkit 兔子神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)试剂盒资料下载
cit 瓜氨酸
PROG ELISAkit 鱼孕激素/孕酮
Salmon calcitonin,SCT ELISAkit 鲑鱼降钙素(SCT)试剂盒资料下载
Fish Thyroxine,T4 ELISAkit 鱼类甲状腺素(T4)试剂盒资料下载
E2 ELISA 鱼雌二醇
ACTH ELISAkit 鱼促肾上腺皮质激素
E ELISAkit 鱼雌激素
FSH ELISAkit 鱼促卵泡素
LH ELISAkit 鱼促黄体激素
AMPK ELISAkit 鱼磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶
PV ELISAkit 鱼卵黄高磷蛋白
MHC ELISAkit 鱼类主要组织相容性复合体
C3 ELISAkit 鲑鱼补体蛋白3
C4 ELISAkit 鲑鱼补体蛋白4
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企业名称
上海沪震生物科技有限公司
企业信息已认证
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信用代码
310112001371133
成立日期
2014-05-08
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经营范围
上海沪震生物科技有限公司
公司地址
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