小鼠白介素20(IL20)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:小鼠白介素20(IL20)检测试剂盒即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
小鼠白介素20(IL20)检测试剂盒实验原理
应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠白介素20(IL20)检测试剂盒相关如下:
Rat Metallothionein,MT ELISAkit 大鼠金属硫蛋白(MT)检测试剂盒96t/48t
Rat cardiac isoform of Tropnin T,cTnT ELISAkit 大鼠心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)检测试剂盒96t/48t
Rat Acetylcholinesterase,AChE ELISAkit 大鼠乙酰胆碱酯酶(AChE)检测试剂盒96t/48t
Rat carbohydrate-deficient transferrin,CDT ELISAkit 大鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)检测试剂盒96t/48t
Rat Total bile acide,TBA ELISAkit 大鼠总胆汁酸(TBA)检测试剂盒96t/48t
Rat β2-microglobulin,BMG/β2-MG ELISAkit 大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)检测试剂盒96t/48t
Rat Retinol-binding protein,RBP ELISAkit 大鼠视黄醇结合蛋白(RBP)检测试剂盒96t/48t
Rat anti-gonadotropin-releasing hormone receptor 大鼠促性腺激素释放激素受体抗体(GNRHR-Ab)检测试剂盒96t/48t
Rat von Willebrand Factor cleaving 大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)检测试剂盒96t/48t
Rat major basic protein,MBP ELISAkit 大鼠主要碱性蛋白(MBP)检测试剂盒96t/48t
Rat eosinophil cationic protein,ECP ELISAkit 大鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)检测试剂盒96t/48t
Rat calcineurin,CaN ELISAkit 大鼠钙调磷酸酶(CaN)检测试剂盒96t/48t
Rat Inhibin binding protein,INHBP ELISAkit 大鼠抑制素结合蛋白(INHBP)检测试剂盒96t/48t
Rat anti-Thyroid-Peroxidase antibody,TPO-Ab ELISAkit 大鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)检测试剂盒96t/48t
Rat apoptosis inducing factor,AIF ELISAkit 大鼠凋亡诱导因子(AIF)检测试剂盒96t/48t
Rat anti-double stranded DNA,dsDNA ELISAkit 大鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)检测试剂盒96t/48t
Rat alkaline phosphatase,ALP ELISAkit 大鼠碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒96t/48t
Rat Angiopoietin 4,ANG-4 ELISAkit 大鼠血管生成素4(ANG-4)检测试剂盒96t/48t
Rat lipolysaccharide binding protein,LBP ELISAkit 大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)检测试剂盒96t/48t
Rat alcohol dehydrogenase,ADH ELISAkit 大鼠乙醇脱氢酶(ADH)检测试剂盒96t/48t
Rat aldehyde dehydrogenase,ALDH ELISAkit 大鼠乙醛脱氢酶(ALDH)检测试剂盒96t/48t
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