小鼠肌酸激酶MB同工酶(CKMB)试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,小鼠肌酸激酶MB同工酶(CKMB)试剂盒观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
小鼠肌酸激酶MB同工酶(CKMB)试剂盒实验原理
应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠肌酸激酶MB同工酶(CKMB)试剂盒相关如下:
Mouse Qa lymphocyte antigen 2 region,Qa-2 ELISAkit 小鼠Qa淋巴细胞抗原2(Qa-2)检测试剂盒96t/48t
Mouse D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISAkit 小鼠D-乳酸脱氢酶(D-LDH)检测试剂盒96t/48t
Mouse Lysozyme,LZM ELISAkit 小鼠孕酮受体(PROGR)检测试剂盒96t/48t
Mouse β-catenin,β-cat ELISAkit 小鼠β连环蛋白/联蛋白(β-Cat)检测试剂盒96t/48t
Mouse CTX-2 ELISAkit 小鼠骨退化特异标志物(CTX-2)检测试剂盒96t/48t
Mouse pituitary adenylate cyclase activating 小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)检测试剂盒96t/48t
Mouse Angiotensin converting enzyme,ACE ELISAkit 小鼠血管紧张素转化酶(ACE)检测试剂盒96t/48t
Mouse angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISAkit 小鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)检测试剂盒96t/48t
Mouse keratinocyte autocrine 小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)检测试剂盒96t/48t
Mouse Activin A,ACV-A ELISAkit 小鼠活化素A(ACV-A)检测试剂盒96t/48t
Mouse Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISAkit 小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)检测试剂盒96t/48t
Mouse Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISAkit 小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)检测试剂盒96t/48t
Mouse Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISAkit 小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)检测试剂盒96t/48t
Mouse Insulin-like growth factor binding protein 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)检测试剂盒96t/48t
Mouse Macrophage Inflammatory Protein 1δ,MIP-1δ 小鼠巨噬细胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)检测试剂盒96t/48t
Mouse pulmonary activation regulated chemokine,PARC 小鼠肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)检测试剂盒96t/48t
Mouse Lysozyme,LZM ELISAkit 小鼠溶菌酶(LZM)检测试剂盒96t/48t
Mouse soluble cluster of differentiation 30,sCD30 ELISAkit 小鼠可溶性CD30(sCD30)检测试剂盒96t/48t
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