小鼠肝肾骨碱性磷酸酶(ALPL)试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,小鼠肝肾骨碱性磷酸酶(ALPL)试剂盒观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
小鼠肝肾骨碱性磷酸酶(ALPL)试剂盒实验原理
应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠肝肾骨碱性磷酸酶(ALPL)试剂盒相关如下:
Mouse phosphatidylserine,PS ELISAkit 小鼠磷脂酰丝氨酸(PS)检测试剂盒96t/48t
Mouse choline phosphoglyceride,PC/CPG ELISAkit 小鼠胆碱磷酸甘油酯(PC/CPG)检测试剂盒96t/48t
Mouse Cross-linked Carboxy-terminal telopeptide of type Ⅰ 小鼠Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(ⅠCTP)检测试剂盒96t/48t
Mouse neurofilament protein,NF ELISAkit 小鼠神经丝蛋白(NF)检测试剂盒96t/48t
Mouse small nuclear ribonucleoprotein,snRNP/Sm ELISAkit 小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗体(snRNP/Sm)检测试剂盒96t/48t
Mouse serine/threonine protein kinase,STK ELISAkit 小鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(STK)检测试剂盒96t/48t
Mouse CTX-2 ELISAkit 小鼠高铁血红蛋白(MHB)检测试剂盒96t/48t
Mouse C-telopeptide of type Ⅰ collagen,CTX-Ⅰ ELISAkit 小鼠Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)检测试剂盒96t/48t
Mouse anti-oligodendrocyte-myelin glycoprotein 小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体(OMgp-Ab)检测试剂盒96t/48t
Rat inhibitory subunit of NF-κBα,IKBα ELISAkit 大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)检测试剂盒96t/48t
Mouse Anti-nuclear Antibody,ANA ELISAkit 小鼠抗核抗体(ANA)检测试剂盒96t/48t
Mouse keyhole limpet hemocyanin,KLH ELISAkit 小鼠钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)检测试剂盒96t/48t
Mouse A Disintegrin And Metalloprotease 9,ADAM9 ELISAkit 小鼠解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)检测试剂盒96t/48t
Mouse oxidizided glutathione,GSGS ELISAkit 小鼠氧化型谷胱甘肽(GSGS)检测试剂盒96t/48t
Mouse reduced glutathione,GSH ELISAkit 小鼠还原型谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒96t/48t
Mouse Troponin T,Tn-T ELISAkit 小鼠肌钙蛋白T(Tn-T)检测试剂盒96t/48t
Mouse c-fos ELISAkit 小鼠c-fos 检测试剂盒96t/48t
Mouse c-jun ELISAkit 小鼠c-jun 检测试剂盒96t/48t
Mouse anti-zona pellucida antibody,aZP ELISAkit 小鼠抗透明带抗体(aZP)检测试剂盒96t/48t
Mouse Mucin-7,MUC7 ELISAkit 小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)检测试剂盒96t/48t
Mouse eosinophil cationic protein,ECP ELISAkit 小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)检测试剂盒96t/48t
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