小鼠组织金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
小鼠组织金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)检测试剂盒实验原理
应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠组织金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)检测试剂盒相关如下:
Human glutathione S-transferases,GSTpi ELISAkit人谷胱甘肽硫转移酶pi基因(GSTpi)检测试剂盒96t/48t
Human glutathione S-transferases,GSTs ELISAkit人谷胱甘肽S转移酶(GSTs)检测试剂盒96t/48t
Human deubiquitinating enzyme,DUB ELISAkit人泛素分解酶(DUB)检测试剂盒96t/48t
Human secreted phospholipase A2,sPLA2 ELISAkit人分泌型磷脂酶A2(sPLA2)检测试剂盒96t/48t
Human E3/ubiquitin-protein ligase,E3/UBPL ELISAkit人泛素连接酶(E3/UBPL)检测试剂盒96t/48t
Human mast cell tryptase,MCT ELISAkit人肥大细胞类胰蛋白酶(MCT)检测试剂盒96t/48t
Human dopachrome tautomerase,DT ELISAkit人多巴色素异构酶(DT)检测试剂盒96t/48t
Human E2/ubiquitin-conjugating enzyme,E2/UBCE ELISAkit人泛素结合酶(E2/UBCE)检测试剂盒96t/48t
Human protein disulfide isomerase,PDI ELISAkit人蛋白质二硫键异构酶(PDI)检测试剂盒96t/48t
Human caspase activated deoxyribonuclease,CAD 人胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶(CAD)检测试剂盒96t/48t
Humanγ-glutamyl systeine synthetase,γ-ECS ELISAkit人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS)检测试剂盒96t/48t
Human E1/ubiquitin-activating enzyme,E1/UBAE ELISAkit人泛素激活酶(E1/UBAE)检测试剂盒96t/48t
Human Pepsin,PP ELISAkit人胃蛋白酶(PP)检测试剂盒96t/48t
Human Hexokinase,HK ELISAkit人己糖激酶(HK)检测试剂盒96t/48t
Human pyruvate dehydrogenase-E1,PDH E1 ELISAkit人丙酮酸脱氢酶E1(PDH E1)检测试剂盒96t/48t
Human glycogen synthase kinase,GSK ELISAkit人糖原合成酶激酶(GSK)检测试剂盒96t/48t
Human Caspase-9,Casp-9 ELISAkit人胱天蛋白酶9(Casp-9)检测试剂盒96t/48t
Human Caspase 3,Casp-3 ELISAkit人胱天蛋白酶3(Casp-3)检测试剂盒96t/48t
Human neutrophil elastase,NE ELISAkit人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)检测试剂盒96t/48t
Human carbonic anhydrase 2,CA-2 ELISAkit 人碳酸酐酶2(CA-2)检测试剂盒96t/48t
小鼠组织金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)检测试剂盒Human A Disintegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISAkit人解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)检测试剂盒96t/48t
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