小鼠碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。小鼠碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)检测试剂盒然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
小鼠碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)检测试剂盒实验原理
应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)检测试剂盒相关如下:
Human Kallikrein 6,KLK 6 ELISAkit人激肽释放酶6(KLK 6)检测试剂盒96t/48t
Human Fructose-1,6-bisphosphate aldolase,FDA ELISAkit人果糖1,6二磷酸醛缩酶(FDA)检测试剂盒96t/48t
Human cathepsin D,cath-D ELISAkit人组织蛋白酶D(cath-D)检测试剂盒96t/48t
Human hormone sensitive lipase,HSL ELISAkit人激素敏感性脂肪酶(HSL)检测试剂盒96t/48t
Human pancreatickininogenase,PK ELISAkit人胰激肽原酶(PK)检测试剂盒96t/48t
Human aconitase 2,ACO-2 ELISAkit人乌头酸酶2(ACO-2)检测试剂盒96t/48t
Human 26S proteasome,26S PSM ELISAkit人26S蛋白酶体(26S PSM)检测试剂盒96t/48t
Human Cyclin-dependent kinase 4,CDK-4 ELISAkit人周期素依赖性激酶4(CDK-4)检测试剂盒96t/48t
Human Placental alkaline pkosphatase,PLAP ELISAkit人胎盘碱性磷酸酶(PLAP)检测试剂盒96t/48t
Human receptor tyrosine kinase,RTKs ELISAkit人受体酪氨酸激酶(RTKs)检测试剂盒96t/48t
Human mitogen activited protein kinase,MAPK ELISAkit人丝裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)检测试剂盒96t/48t
Human Lysozyme,LZM ELISAkit人溶菌酶(LZM)检测试剂盒96t/48t
Human focal adhesion kinase,FAK ELISAkit人黏着斑激酶(FAK)检测试剂盒96t/48t
Human soluble Phospholipase A2,sPL-A2 ELISAkit人可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)检测试剂盒96t/48t
Human deoxyribonuclease Ⅰ,DNase-Ⅰ ELISAkit人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)检测试剂盒96t/48t
Human Arginase,Arg ELISAkit人精氨酸酶(Arg)检测试剂盒96t/48t
Human neutrophilic alkaline phosphatase,NAP ELISAkit人中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)检测试剂盒96t/48t
Human anapastic lymphoma kinase,ALK ELISAkit人间变性淋巴瘤激酶(ALK)检测试剂盒96t/48t
Human cytokinin MB,CKMB ELISAkit人激动异构酶/细胞分裂素MB(CKMB)检测试剂盒96t/48t
Human myosin light chain kinase,MLCK ELISAkit人肌球蛋白轻链激酶(MLCK)检测试剂盒96t/48t
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