小鼠免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。小鼠免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
小鼠免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒实验原理
应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒相关如下:
Human serine protease,PRSS ELISAkit人丝氨酸蛋白酶(PRSS)检测试剂盒96t/48t
Human spleen tyrosine kinase,Syk ELISAkit人脾脏酪氨酸激酶(Syk)检测试剂盒96t/48t
Human serine/threonine protein kinase,STK ELISAkit人丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(STK)检测试剂盒96t/48t
Human interleukin receptor associated kinase,IRAK ELISAkit人白介素受体相关激酶(IRAK)检测试剂盒96t/48t
Human urokinase,UK ELISAkit人尿激酶(UK)检测试剂盒96t/48t
Human phosphoenolpyruvate carboxykinase,PCK ELISAkit 人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)检测试剂盒96t/48t
Human trypsin ELISAkit 人胰蛋白酶(trypsin)检测试剂盒96t/48t
Human β-site APP-Cleaving Enzyme 1,1BACE1 ELISAkit人β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)检测试剂盒96t/48t
Human Protein disulfide-isomerase precursor,PDI ELISAkit人蛋白二硫化物异构酶前体(PDI)检测试剂盒96t/48t
Human protein disulfide-isomerase A3,PDIA3 ELISAkit人蛋白二硫化物异构酶A3(PDIA3)检测试剂盒96t/48t
Human sorbitol dehydrogenase,SDH ELISAkit人山梨醇脱氢酶(SDH)检测试剂盒96t/48t
Human Peptidyl prolyl cis/trans isomerase,PPI ELISAkit人肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)检测试剂盒96t/48t
Human ornithine carbamoyl transferase,OCT ELISAkit人鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)检测试剂盒96t/48t
Human Visceral adipose-specific serine protease 人内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)检测试剂盒96t/48t
Human Protein Phosphatase,PP ELISAkit人蛋白磷酸酶(PP)检测试剂盒96t/48t
Human thioredoxin reductase,TrxR ELISAkit人硫氧还蛋白还原酶(TrxR)检测试剂盒96t/48t
Human leukocyte exastase,HLE ELISAkit人白细胞弹性蛋白酶(HLE)检测试剂盒96t/48t
Human Elastase ELISAkit人弹性蛋白酶(Elastase)检测试剂盒96t/48t
Human α-Amylase,AMS/AMY ELISAkit人α淀粉酶(AMS/AMY)检测试剂盒96t/48t
Human alkaline phosphatase,ALP ELISAkit人碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒96t/48t
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